Alexa Fluor 488-Con A，AF488标记刀豆蛋白A

产品简介

刀豆蛋白A（Concanavalin A，Con A），来源于Canavalia ensiformis洋刀豆（刀豆），是一种凝集素蛋白（Mw 104kDa）。pH≥7.0条件下，Con A以同质四聚体结构形式存在，由四个分子量为26kDa的亚基构成。酸性条件（pH 4.5-5.5）下，Con A解离为活化的二聚体结构（52kDa）。每一个单体，不管pH值或分子结构如何，都包含2个金属离子结合位点。金属离子（Ca2+ 和 Mn2+ ）必须结合到这两个位点上Con A才能发挥活性。乙酰化、琥珀酰化或其他衍生物也能产生稳定的二聚体结构形式。

刀豆蛋白A（Concanavalin A，Con A）无血型特异性，但选择性结合发现于各种糖蛋白、糖脂和糖类分子上的α-甘露糖基（α-mannosyl residues）和α-葡糖基残基（α-glucosyl residues），需要Ca2+ 和 Mn2+ 离子存在才能显示活性。Con A适用于碳水化合物研究，糖蛋白纯化，酶标记（enzyme tagging），细胞膜研究，细胞凝集，和细胞分型研究。

本品是Alexa Fluor 488标记的刀豆蛋白（Alexa Fluor 488 labeled Concanavalin A, Alexa Fluor 488-ConA），Ex/Em=495/519nm，亲和纯化所得，基本不含未标记的荧光素。建议工作浓度范围是5-25μg/ml。

产品特性

英文同义名：Concanavalin A from Canavalia ensiformis (Jack bean),Alexa Fluor 488 Conjugate; Alexa Fluor 488-ConA; Alexa Fluor 488 labeled Concanavalin A (ConA); ConA lectin (Alexa Fluor 488);

中文同义名：刀豆蛋白 A 来源于洋刀豆 （刀豆），Alexa Fluor 488标记；Alexa Fluor 488标记的刀豆凝集素A；Alexa Fluor 488标记的刀豆球蛋白A；Alexa Fluor 488标记的伴刀豆球蛋白A；

糖类特异性：α-甘露糖；α-葡萄糖；

外观：固体

Ex/Em：495/519nm

荧光颜色：绿色

应用：IF、糖生物学

保存与运输方法：-20℃避光干燥保存，至少1年有效。 冰袋运输。

操作流程

一、储存液准备

于使用前，将低温保存的Alexa Fluor 488-ConA（1mg）置于室温回温至少30min，低速离心2-3min，往管内加入500µl ddH2O（无菌）制备2mg/ml储存液。短时间使用可保存在2-8℃，长时间使用请根据单次用量分装保存后置于-20℃保存，避免反复冻融，至少一个月稳定。

二、活细胞染色

【注①】于使用前将低温保存的产品置于室温使其完全融化，之后低速离心，吸取上清，用于后续实验。这一步骤能去除本品保存过程中可能形成的蛋白聚集物，从而降低非特异性背景染色。

【注②】刀豆蛋白偶联物（比如：Alexa Fluor 488-ConA）对细胞质膜染色，且在质膜内陷后最终对胞内囊泡染色。

三、固定细胞染色

【注①】于使用前将低温保存的产品置于室温使其完全融化，之后低速离心，吸取上清，用于后续实验。这一步骤能去除本品保存过程中可能形成的蛋白聚集物，从而降低非特异性背景染色。

【注②】刀豆蛋白偶联物（比如：Alexa Fluor 488-ConA）不具细胞膜渗透性，因此，固定（未透化）的细胞呈现细胞质膜染色。如果，细胞固定后再做透化处理，会引起胞浆质膜的染色。

注意事项

1）本品储存液长期保存可能会产生沉淀，使用前请37℃温育数分钟，之后离心吸取上清使用。此操作基本不会对产生性能造成负影响。

2）荧光染料都存在淬灭的问题，保存和操作过程中注意避光。

3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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