Alexa Fluor 488标记麦胚凝集素WGA

产品简介

麦胚凝集素（Wheat Germ Agglutinin，WGA）是广泛应用于细胞生物学的凝集素之一。WGA识别的糖类受体是N-乙酰葡糖胺（GlcNAc），倾向与N-乙酰葡糖胺的二聚体和三聚体结合。WGA能结合含N-乙酰葡糖胺末端或壳二糖的寡糖，这类结构在许多血清和膜来源糖蛋白中普遍存在。细菌细胞壁肽聚糖、甲壳素（几丁质）、软骨糖胺聚糖和糖脂也能结合WGA。天然WGA还能通过N-乙酰神经氨酸（唾液酸）残基与一些糖蛋白相互作用。WGA适用于胰岛素受体的纯化、血清蛋白和神经示踪。

麦胚凝集素（Wheat Germ Agglutinin，WGA）通常用来标记糖蛋白，用于活细胞或固定细胞的质膜成像，用于组织切片染色或其它标准的免疫分析实验。WGA能用作一种革兰氏染色剂，荧光标记革兰氏阳性菌（非革兰氏阴性菌）。还能用于结合出芽酵母（比如酿酒酵母）的出芽痕。

本品是Alexa Fluor 488标记的麦胚凝集素（Alexa Fluor 488 labeled Wheat Germ Agglutinin, Alexa Fluor 488- WGA），Ex/Em=495/519nm，亲和纯化所得，基本不含未标记的荧光素。建议工作浓度范围是5-20μg/ml。

产品特性

1） 英文同义名：Wheat Germ Agglutinin, Alexa Fluor 488 Conjugate; Alexa Fluor 488 labeled Wheat Germ Agglutinin; Wheat germ agglutinin lectin, Alexa Fluor 488 Conjugate; Alexa Fluor 488labeled WGA Lectin;

2） 中文同义名：麦胚凝集素，Alexa Fluor 488标记；Alexa Fluor 488标记的麦胚凝集素；Alexa Fluor 488标记的小麦胚芽凝集素；

3） 糖类特异性：N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）

4） 外观：固体

5） Ex/Em：495/519nm

6） 荧光颜色：绿色

7） 应用：IF、糖生物学

保存与运输方法:-20℃避光干燥保存，至少1年有效。冰袋运输。

质膜标记操作流程

1、储存液准备

于使用前，将低温保存的Alexa Fluor 488-WGA（1mg）置于室温回温至少30min，低速离心2-3min，往管内加入500µl ddH2O（无菌）制备2mg/ml储存液。短时间使用可保存在2-8℃，长时间使用请根据单次用量分装保存后置于-20℃保存，避免反复冻融，至少一个月稳定。

2、标记活的真核细胞

以下是对贴壁培养在盖玻片上的活细胞的通用染色步骤。用户需根据不同的模型系统和预期效果来优化染色时间和浓度。

2.1制备染色工作液：用合适的生理缓冲液，比如：HBSS（无酚红）（Cat#：FSH041-500ML）或HHBS（Cat#：FSH043-500ML），稀释Alexa Fluor 488-WGA（2mg/ml）储存液到工作浓度，常用工作浓度范围为5-20μg/ml。使用细胞培养基稀释WGA偶联物用于标记可能导致增高的非细胞染色背景。

2.2细胞标记：加入足量的染色工作液完全覆盖盖玻片上的细胞。37℃孵育10-30min。

2.3细胞清洗：标记结束后，吸走染色工作液，用合适的缓冲液清洗细胞2次。除非细胞要做固定，此时即可在预热的HBSS或其它适合于成像的缓冲液中封片。

2.4【可选】细胞固定：可能用4%多聚甲醛固定染色好的细胞，37℃ 15min，之后用缓冲液清洗，以及做另一种复染。如有必要用0.2% Triton X-100透化细胞。

3、标记固定的真核细胞

以下是对贴壁培养、甲醛固定且未做透化处理细胞的通用染色步骤。用户需根据不同的模型系统和预期效果来优化染色时间和浓度。

3.1细胞固定：4%多聚甲醛固定细胞，37℃处理15min。

3.2细胞清洗：用HBSS（不含酚红）清洗细胞三次。不要透化细胞！！！

3.3准备染色工作液：用合适的生理缓冲液，比如：HBSS（无酚红）（Cat#：FSH041-500ML）或HHBS（Cat#：FSH043-500ML），稀释Alexa Fluor 488-WGA（2mg/ml）储存液到工作浓度，常用工作浓度范围为5-20μg/ml。使用细胞培养基稀释WGA偶联物用于标记可能导致增高的非细胞染色背景。

3.4细胞标记：加入足量的染色工作液完全覆盖盖玻片上的细胞。室温孵育10-30min。

3.5细胞清洗：标记结束后，吸走染色工作液，用合适的缓冲液清洗细胞2次。此时可能用0.2% Triton X-100或其它表面活性剂透化细胞，进行接下来的复染或抗体标记。

3.6细胞成像：按照实验需求用另一复染剂染色，之后在缓冲液内封片或抗荧光淬灭剂来封片。

注意事项

1） 本品储存液长期保存可能会产生沉淀，使用前请37℃温育数分钟，之后离心吸取上清使用。此操作基本不会对产生性能造成负影响。

2） 荧光染料都存在淬灭的问题，保存和操作过程中注意避光。

3） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关产品