Fast Mouse tail direct PCR kit 鼠尾基因快速鉴定试剂盒

产品简介

    本产品是一款专为小鼠基因型快速鉴定设计的试剂盒，其中包含了Fast Mouse Genotyping Master Mix、裂解液和中和液三个组分，其中的裂解液和中和液，可对鼠尾组织进行简易处理。Fast Mouse Genotyping Master Mix 可以直接扩增鼠尾组织提取液，30分钟内完成2500bp及以下片段的扩增。Fast Mouse Genotyping Master Mix为2×预混即用型 PCR溶液，包含：突变改造的 pfu DNA Polymerase，抗体修饰突变 Taq DNA Polymerase、dNTPs、Mg2+、反应缓冲液和稳定剂等成分。PCR产物可以直接用于琼脂糖凝胶 电泳。

产品组成

保存与运输方法:-20℃密封保存，2年有效。组分FSF0031-A Fast Mouse Genotyping Master Mix置于-20℃保存；FSF0031-B和FSF0031-C裂解液和中和液可置于室温密封保存。有效期 24 个月。

使用方法

一、样品基因组 DNA 释放

1.将少量的小鼠尾巴（1mm～2mm）转移至1.5mL 的离心管；

2.加入180μL裂解液，充分震荡混匀，短暂离心；

3.置于98℃金属浴或水浴中，孵育10min；

4.加入90μL 中和液，涡旋震荡混匀，12000 rpm离心2min；

5.将上清转移至新的离心管，4℃或-20℃保存或直接取上清用于后续 PCR 扩增。

【注】:较难裂解的样品，可适当延长孵育时间；取上清时注意不要吸到下层沉淀；注意高温烫伤。

二、PCR 扩增体系

PCR 反应体系，Fast Mouse Genotyping Master Mix 充分溶解，旋涡混匀，按下表配制：

表（A）PCR反应体系配制

【注】： 

①可根据实验的具体情况，对引物浓度进行调整;

②50μL反应体系2μL模板即可，想提高产物量可适当增加模板量，但不能超过反应体系的10%。

三、PCR 扩增程序

表（B）PCR反应程序

【注】：

①退火温度，参考引物理论Tm值，可低于理论值2℃左右；建议引物设计时 Tm 值大于60℃。

②2500bp及下片段可直接延使用上述条件进行，对于复杂模版及更大片段，可以增加延伸时间（30s）和循

环数来提高产物量。对于大片段直接扩增推荐使用CAT#FSF0032

注意事项

1).Master Mix 使用前上下颠倒混匀离心。请不要使用振荡器混匀。如果没有混匀，反应性能会下降。

2).小鼠尾巴样品以 1mm-2mm 左右为宜，尽量选用新鲜干净的小鼠尾巴。

3).实验结束后，请将Master Mix尽快放于-20℃保存,并将裂解液与中和液的瓶盖拧紧。

4).在配制、分装反应液时，请使用新的（无污染的）枪头、离心管，避免污染。

5).为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。