2×FSBR Green(SYBR Green) qPCR Mix

产品简介

本产品是采用 SYBR Green I 嵌合荧光法进行 Real-Time PCR 的专用试剂，可对目标 DNA 进行快速、特异性的定量检测。优化的预混液可缩短 Real-Time PCR 的反应时间，适用于标准或快速 PCR 仪。

2×SYBR Green qPCR Mix采用了特殊抗体修饰的 Hot Start DNA 聚合酶，配合独特的快速 PCR Buffer 体系可确保在所有的 Real-Time PCR 仪上进行灵敏的 qPCR 反应，同时具有高扩增效率，高扩增特异性和宽广的可信范围的特点。本品经检测无外源核酸酶活性。PCR 方法检测无宿主 DNA 和表达载体 DNA 残留，能有效扩增人类基因组中的单拷贝基因。

2×SYBR Green qPCR Mix为2倍浓度的预混液，PCR反应液配制时，取体系0.5 倍体积的Mix，加入模板、引物、用水补足体系便可进行 Real-Time PCR 反应，操作简单方便。

产品组成

【注意】：-20℃ 保存至少12个月，使用前充分融解混匀。 短期使用可放在4℃，避免反复冻融。

适用机型
适用 ROX 终浓度为 1X 的机型：
ABI: 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne, StepOne Plus;
适用 ROX 终浓度为 0.1X 的机型：
ABI: 7500, 7500 Fast, ViiA7, QuantStudio 3 and 5, QuantStudio6,7,12k Flex;
Stratagene MX3000P, MX3005P, MX4000P;
无需 Rox 校正的机型：
Bio-Rad: CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2,
Chromo4;
Eppendorf: Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;
Qiagen: Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;
Roche Applied Science: LightCycler 480, LightCycler 2.0; Lightcycler 96;
Thermo Scientific: PikoReal Cycler; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR.

使用方法

1. 取本品室温解冻，也可提前放置于 2-8℃，解冻后翻转混匀。

2. 配制反应液时，试剂请于冰上放置。

取体系 0.5 倍体积的 Mix,加入模板和引物，用 diH2O 补足体积，可简短离心，以确保反应液均在反应管底部，即可进行 Real-Time PCR 反应。

反应体系举例：

【注】：最佳反应体系和最佳反应条件应根据实际需要设定。

Rox 的添加，可根据不同仪器型号进行选择，具体可参考【适用机型】。为使加入量准确，建议将 ROX

进行稀释后再行添加。

基本特性：本制品兼容性强，适用于不同厂家、型号的荧光定量PCR仪，绝大多数情况下使用二步法和三步法均可获得良好效果。在实际使用中可以根据机型推荐和具体情况对程序加以微调。般来说， 二步法扩增特异性高，三步法扩增效率高。如果融链曲线较差，可以尝试两步法扩增:若因使用Tm值较低的引物等原因，得不到良好的实验结果时，可尝试加长延伸时间或者进行三步法PCR扩增。

PCR 扩增标准程序设置：

【注】a，建议采用两步法进行反应，如果该程序得不到良好的实验结果时，扩增性能较差时，再进行 PCR 条件的优化或者尝试进行三步法 PCR 扩增反应。

b，荧光信号采集（＊），时间设定请按照仪器使用说明书要求进行实验程序设置。

c，熔解曲线通常情况下可以使用仪器默认程序。
注意事项

1） 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

2）分取试剂时务必使用新的枪头（Tip），以防止样品间污染，同时，要使用精确、量程适合的移液枪。

3）当同时需要进行数次反应时，应先配制各种试剂的混合液，然后再分装到每个反应管中，可使所取的试剂体积更准确，减少试剂损失，同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。

4）本品室温解冻，解冻后翻转混匀即可，避免产生气泡，配制反应液时，试剂请于冰上放置。

5）通常引物终浓度为 0.2 μM 可以得到较好结果。反应性能较差时，可以在 0.1～1.0 μM范围内调整引物浓度。