NBD C6-Ceramide for Golgi Staining 高尔基体绿色荧光探针(活细胞和固定细胞)

产品简介

NBD C6-Ceramide for Golgi Staining 高尔基体绿色荧光探针又称Golgi-Tracker Green II (高尔基体绿色荧光探针)，是一种高尔基体绿色荧光探针，是神经鞘脂(Sphingolipid)类荧光探针中的一种，可以用于活细胞和固定细胞的高尔基体特异性荧光染色。

NBD C6-Ceramide for Golgi Staining (Golgi-Tracker Green II)高尔基体绿色荧光探针为采用NBD进行了荧光标记的C6-ceramide。Ceramide或其类似物可以选择性地和高尔基体结合，因此荧光标记的Ceramide可以用作高尔基体特异性的荧光探针。

NBD C6-Ceramide for Golgi Staining (Golgi-Tracker Green II) 高尔基体绿色荧光探针呈绿色荧光，检测时最大激发光波长为466nm，最大发射光波长为536nm。（光谱特征见图 1），本品具有细胞膜渗透性，能快速便捷地在活体细胞和固定细胞中对高尔基体进行绿色荧光标记，可用于细胞器之间的脂质运输和活细胞中的脂质代谢研究；实时观察活细胞中高尔基体形态的变化。而Golgi-Tracker Green (高尔基体绿色荧光探针) (FS1457)仅适用于活细胞的高尔基体荧光标记。

NBD C6-Ceramide for Golgi Staining (Golgi-Tracker Green II)的建议工作浓度为5µM。用于细胞染色时，推荐使用DMSO作为高浓度母液的溶剂。每1mg的本产品可以配制347ml的NBD C6-Ceramide for Golgi Staining (Golgi-Tracker Green II)染色工作液。

产品组成

基本特性

靶点：Golgi-Tracker Green；BODIPY FL C5-Ceramide；Golgi apparatus高尔基体；Golgi-Tracker Red；高尔基体染色探针；BODIPY FL；ER-Tracker Green 内质网荧光探针；Golgi-Tracker Green II；

CAS:86701-10-2/或94885-02-6

分子量：575.74

分子式：C₃₀H₄₉N₅O₆  

纯度：≥98%

最大吸收/发射波长:466/536nm

储存及运输条件：-20ºC避光干燥保存，至少6个月有效。 冰袋运输。

NBD C6-Ceramide for Golgi Staining (Golgi-Tracker Green II)的化学结构式及激发光谱和发射光谱参考图1

使用方法（以下步骤仅做参考，具体请根据实际情况或参考文献资料来调整。）

1.NBD C6-Ceramide for Golgi Staining (Golgi-Tracker Green II)工作液的配制

①将低温保存的产品从冰箱取出后置于室温至少20min，低速离心后，往1mg冻干粉内加入347µl高质量无水DMSO，使其充分溶解，即配制得到5mM的储存液。根据单次用量分装置于-20℃冻存，避免反复冻融。

②吸取一定量NBD C6-Ceramide for Golgi Staining (Golgi-Tracker Green II)（5mM）储存液按照1：1000的比例用HBSS/HEPES来稀释，混匀后即为NBD C6-Ceramide for Golgi Staining (Golgi-Tracker Green II)工作液（5µM），工作液请现配现用。

【注】：NBD C6-Ceramide for Golgi Staining (Golgi-Tracker Green II)的工作浓度请结合实验目的以及实验对象进行适当调整。

2.活细胞高尔基体的荧光标记

①去除细胞培养液，用适量的溶液如HBSS/HEPES或其他缓冲液来洗涤生长在盖玻片上的细胞。

②去除洗涤液，加入新鲜配制的NBD C6-Ceramide工作液（5µM），4℃孵育30min。

③吸走染色液，用冰浴预冷的细胞培养液洗涤细胞3次左右，换新鲜培养液37℃再孵育30min。

④用新鲜培养液再洗涤一次，随后用荧光显微镜或共聚焦显微镜进行观察。此时可观察到高尔基体呈明亮的强荧光染色，而细胞内的其他膜系统呈比较微弱的荧光染色。

3.固定细胞高尔基体的荧光标记

文献报道NBD C6-Ceramide适用于固定细胞染色，而BODIPY FL C5-ceramide和BODIPY TR-ceramide不适合。染色条件总的来说没那么严格。然而，避免使用去污剂和甲醇/丙酮固定剂。

4显微镜检测：

染色完成后，高尔基体呈明亮的强荧光染色，而细胞内的其他膜系统呈比较微弱的荧光染色。NBD C6-Ceramide for Golgi Staining (Golgi-Tracker Green II)的最大激发/发射光分别为466/536 nm。 

注意事项

1）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

3）产品在4℃，冰浴等较低温度下会凝固而粘附在离心管官底、管壁或管盖内，可将置于25℃水浴温育片刻直至全部融解后使用。对于微量液体，每次使用前低速离心使得液体全部沉降至管底，再开盖使用。

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