溶酶体染色应用选购指南
发布日期:2026/8/4 18:46:58
﹄溶酶体染色应用选购指南﹃
背景介绍
溶酶体(Lysosome)又称溶体、溶小体,存在于细胞质中,是单层膜包裹的细胞器,内部富含多种酸性水解酶,外源物质被细胞吞噬(endocytosis)后会先形成内体(endosome),然后跟60几种来源于内质网和高尔基体的水解酶融合形成成熟的溶酶体。溶酶体囊内pH (4.5–5.0)比内体(pH,5.5–6.5)更酸。在这个酸性条件下水解酶的活性被完全激活,从而让溶酶体像人的胃一样把囊内的所有物质消化为小分子为细胞所用。溶酶体也通过自噬机制(Autophagic pathway)对老旧、损坏的细胞器和膜蛋白进行消化分解。溶酶体大小有0.1 μm到1.2 μm,可被荧光显微镜看到。由于溶酶体是细胞内仅有的偏弱酸性的细胞器(除内体外),通过酸敏感荧光探针我们可以显影溶酶体。复申生物(FUSHENBIO®)提供一系列溶酶体探针来显影活细胞的溶酶体。这些酸敏感探针可快速透过细胞膜,在纳摩尔浓度下快速显影活细胞溶酶体结构。_1.png)
溶酶体的结构、功能与检测

目前检测溶酶体异常的手段有很多,包括光镜鉴定法、电镜鉴定法、.细胞学检测法等等,这些方法可以直接检测到溶酶体外形结构、通透性、pH变化等等。目前人类也开发了一系列溶酶体检测试剂盒,包括细胞膜通透性(LAP)完成性吖啶橙染色试剂、LAMP抗体及二抗,还包括溶酶体探针类染料,LysoTracker(溶酶追踪染料)、LysoSensor(溶酶 pH 传感染料)和DQ-BSA(溶酶体活性检测探针)。LysoTracker探针和LysoSensor探针可以选择性地标记和追踪活细胞酸性细胞器,DQ-BSA(溶酶体活性检测探针)可以直接反映溶酶体蛋白水解活性、自噬溶酶体融合效率。
复申生物(FUSHENBIO®)提供多款不同荧光基团标记的溶酶体探针如:绿色、红色、黄色荧光基团等等,满足您多标实验的不同需求。
产品简介
1. LysoTracker(溶酶追踪染料)
结构:荧光基团 + 弱碱性脂溶性胺,细胞膜自由穿透;
富集机制:胞质 pH7.2–7.4 呈中性脂溶态,自由穿梭膜;进入酸性溶酶体(pH4.5–5.0)被质子化带上电荷,无法透出膜,被困在溶酶内富集染色;
荧光特性:荧光强度基本不随 pH 变化,只要富集就稳定发光;只用来定位酸性囊泡(溶酶体、晚期内体都会染上);
特点:单纯 “染色标记”,不反映酸碱度、也不反映溶酶有没有降解能力。
2. LysoSensor(溶酶 pH 传感染料)
结构:骨架同样是弱碱性酸向染料,也靠质子化富集在酸性细胞器;
关键区别:存在PET 荧光淬灭机制 中性环境:染料未质子化,荧光被自身侧链淬灭,几乎无荧光; 酸性溶酶体内质子化后,淬灭解除,pH 越低、荧光越强; 其中 货号(#FS1441)Yellow/Blue DND-160 为比率型探针,pH 变化会发生蓝→黄荧光颜色偏移,可定量测算溶酶体真实 pH 值;
核心功能:定量检测溶酶体酸化水平。
3. DQ-BSA(溶酶体活性检测探针)
本质:被高密度荧光染料大量标记的 BSA 蛋白,游离状态因分子内荧光聚集发生自淬灭,几乎没有荧光;
入胞方式:只能通过胞吞作用进入细胞,不能自由穿透细胞膜;顺着内吞通路最终抵达溶酶体;
发光机制:只有溶酶体内存在活性蛋白酶、环境酸化正常时,BSA 被水解切成小片段,荧光基团分散、解除自淬灭,发出明亮荧光; 溶酶体酸化受损 / 蛋白酶失活(如巴佛洛霉素、氯喹处理),BSA 无法降解,始终淬灭无荧光。
核心功能:直接反映溶酶体蛋白水解活性、自噬溶酶体融合效率。
溶酶体荧光显影剂选购列表:
|
荧光颜色 |
中文名称 |
激发峰/发射峰(nm) |
滤光片 |
样本类型 |
可否固定 |
pKa |
产品货号 |
|
|
373/422 |
DAPI |
活细胞 |
否 |
N/A | ||
|
|
504/511 |
FITC |
活细胞 |
否 |
N/A | ||
|
|
577/590 |
TRITC |
活细胞 |
否 |
N/A | ||
|
|
647/668 |
Cy5 |
活细胞 |
否 |
N/A | ||
|
|
329,384[2] 440,540[2] |
DAPI or UV longpass |
活细胞 |
否 |
4.2 | ||
|
|
|||||||
|
|
443/505 |
FITC |
活细胞 |
否 |
5.2 | ||
|
|
589/616 |
TRITC |
活细胞 |
可 (染后固定) |
N/A | ||
|
|
490/509 |
FITC |
活细胞 |
可 (染后固定) |
N/A |
【注①】:探针标记细胞后,只能用荧光显微镜观察,而不能用流式或荧光酶标仪检测,因为在总细胞荧光中溶酶体荧光只占非常小的比例。
【注②】:DQ‑BSA(DQ‑Red/Green-BSA)系列
✅ 可以固定,但只能:先活细胞加载探针、完成溶酶体内酶解,之后再固定;绝对不能固定之后再加 DQ‑BSA 染色。
⚠️ 固定后只能保留定位 / 荧光斑点信号,不再反映 “实时酶活性”,活性判读优先活细胞成像。