产品简介
蛋白质印迹膜再生液,即Western一抗二抗去除液/洗脱液(stripping Buffer),用于Western 中膜的重复利用。在Western 中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后,有时还需要检测tubulin、actin 等内参,或对珍稀抗原进行多种抗体的交叉检测。通过使用蛋白质印迹膜再生液,充分去除一抗二抗,可以非常方便地重新利用使用过的膜进行多种抗体的Western 检测。与跑多个SDS-PAGE 胶分别做不同抗体的Western 检测相比,使用蛋白质印迹膜再生液省时省力,节约珍贵抗原。同时可以消除重新上样而带来的误差,使可比性更强。使用蛋白质印迹膜再生液重复处理同一张膜,会在一定程度上导致抗原信号的减弱。本Western 膜再生液经过多个抗体的检测试验,通常可以重复利用膜3-5 次。只需大约30 分钟即可实现膜的重复使用,然后可以进行封闭等后续的Western blot 操作。Western Blot的化学发光反应复申生物同时提供超敏增强型化学发光显色试剂盒,Super ECL Chemiluminescent Substrate Kit 超敏型ECL化学发光显色试剂盒, CAT:FSM0026)
存储条件:常温运输,室温保存,保质期:12个月
使用说明
1.用TBST漂洗印迹5分钟以去除化学发光底物。再将使用过的膜浸泡在本品中,于室温或者在37℃下轻摇 10-30 分钟。
2. 弃去膜再生液,用适量TBST 清洗膜3~4次,每次5 分钟。
3. 重新进行膜的封闭。
4. 一抗孵育。由此开始新一次的western blot 实验。
注意事项
1.FUSHENBIO膜再生液适用于PVDF 膜和NC 膜上的ECL 化学发光检测后的膜的再生。不适用于其他检测手段,如TMB,BCIP 等显色反应检测后的膜的再生。
2.膜再生时间在室温下 15-30 分钟内即可完成,具体需要时间视蛋白和温度环境有所不同。若需检测膜的再生情况,可按照如下操作
2-1).在『使用方法』第三步,重新完成了膜的封闭后,用第一次western blot 使用的二抗重新进行孵育。
2-2).TBST 洗膜 3~4 次,每次5分钟。
2-3).用ECL化学发光试剂盒检测样品,若无第一次western blot 做出的信号,则表明原有的一抗和二抗均已洗脱完全,可以进行第二次western blot。
3.使用本品进行膜的再生,每一次都会有少许抗原损失,故同一张膜可以反复使用 3-5 次。
4.本产品仅供科研使用。为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。