FUSHENBIO®无蛋白快速封闭液

 FUSHENBIOProtein Free Fast Blocking Buffer（快速封闭液）是最新一代的即用型、高效快速Western封闭液。封闭时间仅需 10 分钟，效果优于脱脂奶粉、BSA、酪蛋白等传统封闭液，简化了 Western 印迹方案。使用快速封闭液封闭可阻止抗体检测期间的非特异性结合，但允许进行特异性检测。与传统封闭液相比，有更高的信号，更低的背景值，信噪比更高。

该试剂不含有哺乳动物来源的蛋白成分，避免与抗体发生交叉反应。该缓冲液可与磷酸化的抗体以及NC膜和 PVDF 膜兼容。但不适用于生物素标记的抗体。

产品特点

① 即用型封闭液，无需配制，使用便捷；

② 封闭时间短，仅需5-10 min，快速高效；

③ 背景低、信噪比高，优于常规奶粉、BSA、酪蛋白等封闭效果；

④ 不含哺乳动物来源的蛋白，确保低背景和高信噪比，可兼容磷酸化的抗体。

操作步骤

1. Western Blot中膜的封闭

1.1，完成转膜后，将膜移入到平皿或者其他适合的容器中（可以不洗涤膜）。

1.2，根据膜的大小，加入适量体积的FUSHENBIOProtein Free Fast Blocking Buffer （快速封闭液），需完全浸没覆盖膜，对于 7.5x 8cm 的膜推荐使用量 5-10ml。

1.3，置于水平摇床上，室温条件下振荡孵育 5-10 分钟。

1.4，取出封闭完成的膜，用洗涤液冲洗蛋白膜 2-3 次，即可用于一抗孵育等后续 western blot 实验。 

2. ELISA实验中基底的封闭

2.1，使用抗原或抗体包被ELISA平板；

2.2，每孔添加300 μL无蛋白快速封闭液，37℃孵育5分钟；

2.3， 按照ELISA实验要求，继续进行洗涤或甩板等后续步骤。

3. IHC和IF实验中的封闭

3.1，IHC和IF实验中使用本试剂作为溶剂溶解3%的BSA，相较于PBS溶解的BSA，它在各组织中拥有稳定的封闭性能，优异的封闭效果；对于特异性好的抗体，可直接用本试剂作为封闭剂

3.2，组织切片准备好之后加入无蛋白封闭剂或者溶有BSA的无蛋白封闭剂，室温静置30分钟（具有组织差异性）；一定要完全覆盖样本，避免样品干燥产生高背景

运输及保存条件：4℃保存，冰袋运输，至少 1 年有效； 长期可以放置-20℃。

注意事项

1）通常用于 PVDF 膜或 NC 膜的封闭时间为10分钟。对于背景低的抗体，可以缩短到5分钟，而对于一些背景非常高的抗体，可以尝试将封闭时间延长为30-60分钟。

2）由于没有任何一种封闭液是适用于所有实验体系的，因此对于一些特殊的实验或抗体，可能需要根据具体情况考虑使用其它更合适的封闭液。

3）信号弱或者无信号：有可能是上样量不足；转膜效率低；抗体效价低，特异性差等原因造成，需要根据实验情况优化实验条件。

4）背景高：有可能是抗体使用量过多；膜洗涤时间不足；抗体和封闭液发生交叉反应；试剂或仪器设备被污染等原因造成，需要根据实验具体情况进行调整。

5）为了您的安全和健康，实验时请穿实验服并戴一次性手套操作。

本产品仅供科研用途！