Tris-Glycine Transfer Buffer (Powder)普通转膜缓冲液(1×)

产品简介

Western转移缓冲液又称蛋白印迹转移缓冲液或转膜缓冲液，适用于Western Blot实验中把蛋白质转移到PVDF膜或硝酸纤维素(NC)膜上，以便进行抗体的孵育和下游实验。Western转移缓冲粉剂主要成分为Tris、甘氨酸等，不含甲醇，主要用于蛋白质转移到PVDF膜或硝酸纤维素(NC)膜，不适用于把蛋白质转移到尼龙膜上。该试剂为粉剂，溶解于去离子水后使用。

本Western转膜液共1包，可以配制1升 保存条件：室温保存，有效期为 2 年。

使用说明

1. 每袋转膜缓冲液干粉（单包净重16.8g）溶解于600 mL水中，然后加入200 mL甲醇（可用乙醇替代）充分混匀，加水定容至1000 mL；

2. 对于常规中小分子量蛋白（25-70 kDa），建议转膜条件为300 mA，30 min左右；

3. 对于常规大分子量蛋白，可酌情延长转膜时间，建议转膜条件为300 mA，45-60 min；

4. 对于20 kDa以下小分子量蛋白，建议使用孔径更小的0.22 μm PVDF膜，转膜条件为200 mA，20-25 min或300 mA，15-20 min，亦可增加甲醇（可用乙醇替代）含量至25%以加强对凝胶里小分子蛋白的固定作用；

5. 对于分子量特别大的蛋白，延长转膜时间，建议转膜条件为300 mA，60-90 min或更长，亦可在转膜液中加入适量SDS至终浓度0.025-0.1%左右，以加强蛋白从凝胶中的释放。同时，由于转膜时间较长，应注意降温模块的降温作用，必要时可中途更换新的降温模块。

注意事项

1.配制时需使用分析纯级别的乙醇或纯度更高的乙醇。

2.配制好的半干法转膜液可室温或4℃保存，通常两周内使用没有任何问题，当颜色变成浅棕色或黄褐色，应丢弃。

3.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。