产品简介
本产品包含胶原酶粗提取物等添加剂,在有效裂解甲基丙烯酰化明胶(GelMA)类生物水凝胶材料的前提下,可较好的保持水凝胶内细胞的生物学活性。
使用方法
一、产品溶解
1、使用前先离心,将粘附在原装管壁上的粉末离心至管底;
2、用 2ml 细胞培养级别的 1×PBS 溶液充分溶解原装管粉末,并用0.22um滤膜过滤除菌(先加1ml 1×PBS 溶解,再加 1ml 1×PBS 润洗原装管);
3、过滤所得裂解液原液的浓度为50mg/ml,可立即使用或分装避光保存在-20℃。
二、裂解载细胞 GelMA 胶块方法说明
1、用细胞完全培养基配制 0.3mg/ml 的工作液(即 1ml 工作液加6ul 裂解液原液);
2、在板孔内加入可浸没 GelMA 胶块的工作液后,用移液枪反复吹打,使胶块与板底分离并充分破碎,胶块越小,裂解速度越快;
3、37℃培养箱无菌裂解,每15分钟在显微镜下观察裂解情况;
4、充分裂解后 1000 转离心5分钟,弃上清,加入5ml完全培养基重复洗涤离心1次,所获细胞即可继续培养或进一步做蛋白及核酸提取等检测分析。
注意事项
1)产品尽量避免反复冻融,初次溶解过滤除菌后可进行分装。
2)裂解速度与 GelMA 型号、使用浓度以及胶块大小均有关,通常0.5~2h 即可充分裂解。
3)裂解体积较大的载细胞 GelMA 胶块时,需充分破碎胶块,可用移液枪反复吹打或用无菌镊子、剪子等器械进行辅助破碎。