罗丹明B标记甲基丙烯酰化明胶（RB-GelMA）

产品简介

明胶（Gelatin）是经胶原蛋白适度水解和热变性得到的天然生物高分子材料，其具有和胶原相似的氨基酸序列。明胶侧链上含有多种活性基团，如氨基、羧基、羟基等，多位点化学修饰的可能性使明胶受到众多水凝胶研究者的青睐。

 甲基丙烯酰化明胶（Gelatin Methacryloyl, GelMA）为烯烃双键改性明胶，其可通过紫外及可见光在光引发剂作用下迅速固化成胶。GelMA光固化水凝胶兼具天然和合成生物材料的特征，其具有适于细胞生长和分化的三维（3D）结构。GelMA水凝胶具有优异的生物相容性和细胞反应特性，例如提供合适的细胞粘附位点及蛋白水解降解性，其可以取代人工基底膜或其他天然胶原蛋白水凝胶。GelMA水凝胶具有良好的机械性能，其构建的3D微支架具有可调的机械和化学性质。此外，GelMA具备良好的温敏凝胶特性和可降解性，其机械性能可调，能够提供多种黏弹特性。GelMA还可以与PEGNB、HAMA或者丙烯酰基修饰的其他高分子形成不同性能的水凝胶以适用于不同的研究目的。

本品为罗丹明B标记甲基丙烯酰化明胶（RB-GelMA）,FITC是异硫氰酸荧光素，罗丹明B的激发波长和发射波长分别约为544nm和576nm，但通常在570nm附近激发，并在590-595nm范围内发射红色荧光。荧光标记的 GelMA 是在 GelMA 分子上化学接枝荧光分子，通过改变荧光分子类型而使其具有特定的荧光颜色。此化学标记方法避免了物理混合或静电吸附等方法中荧光分子容易扩散出体系的缺点，同时也避免了荧光微粒成像不均的缺点。该荧光GelMA 具有良好生物相容性，在体内外成像、示踪、材料降解、生物传感及 3D 打印工艺等领域有广阔的应用前景。

产品应用

GelMA广泛应用于细胞3D培养、组织工程、生物3D打印等研究领域；

产品组成

保存与运输方法

冻干粉：2-8℃避光干燥保存，至少1年有效。-20℃避光干燥保存，至少2年有效。

无菌溶液：2-8℃避光保存，1周；-20℃避光保存，1个月。

运输：冰袋运输。

产品特性

中文名称：罗丹明B标记甲基丙烯酰化明胶（RB-GelMA）；甲基丙烯酰化明胶（GelMA），Gel-MA水凝胶;

英文名：罗丹明B-GelMA；Gel-MA，Gelatin Methacryloyl

性状：海绵状。

分子量：100~200kDa

浊度：≤20NTU

蓝光固化技术

   蓝光固化技术是近几年发展成熟的新技术，相对于紫外光容易引起染色体变异和高细胞毒性，蓝光固化对细胞低毒性，且对人体皮肤和眼睛损伤更小。【注】：请勿直视固化光源。蓝光引发剂（LAP）CAT#FS1429是最常见的一种可见光光引发剂。在蓝光作用下，LAP迅速引发光敏水凝胶材料固化。

  1、超过400纳米吸光度，位于可见光波段，从而使有效的可见光（包括蓝光）聚合效应;

  2、更低的细胞毒性，蓝光固化后细胞活性90%以上.

使用方法

一、溶液配制

1.称取0.025g引发剂LAP加入10ml PBS配制成2.5mg/ml标准工作液。以40-50℃水浴加热溶解15分钟，期间振荡数次。该LAP标准工作液可在4℃避光条件下可保存12个月。

2.配制荧光GelMA 溶液（建议荧光GelMA推荐浓度为5-30% (w/v)，即50-300mg/ml）

2-1.称取所需用量的荧光标记 GelMA 放入离心管中；

2-2.取引发剂LAP标准工作液加入到上述的离心管中，振荡使荧光标记GelMA 充分浸润；

2-3.以40-50℃水浴避光加热溶解30分钟，期间振荡数次；

2-4.将GelMA 溶液立即用0.22μm无菌针头过滤器灭菌（防止低温凝胶化）。

二、不同应用场景建议

二维细胞培养建议

①将荧光标记GelMA溶液于37℃水浴保温备用（防止低温凝胶化）；Ø

②趁热将荧光标记GelMA 溶液注入孔板：

（96孔板：50~100μL/孔，48孔板：100~300μL/孔，24孔板：300~500μL/孔）；

③405nm 光源，照射10-30秒使凝胶化，可通过光照时间及浓度调控凝胶强度；Ø

④将培养基加入孔中覆盖凝胶，置于37℃培养箱中5分钟，清洗样品，吸去培养基；Ø

⑤将细胞悬浮液加入到孔板中即可。根据实验设计进行培养基更换、观察拍照等操作（操作程序无特殊要求）。

三维细胞培养建议

①收集细胞沉淀并用37℃预热的荧光 GelMA 溶液重悬，配制细胞悬液；Ø

②向孔板中加入细胞悬浮液：

（96 孔板：50~100μL/孔，48 孔板：100~300μL/孔，24 孔板：300~500μL/孔）；Ø

③405nm 光源，照射 10-30 秒使凝胶化，可通过光照时间及浓度调控凝胶强度；Ø

④向各孔加入培养基，于 37℃培养箱中5分钟，清洗样品，移去培养基；Ø

⑤加入新鲜培养基并长期培养。根据实验设计进行培养基更换、观察拍照等操作（操作程序无特殊要求）。 【注】：在配制不同浓度荧光标记GelMA 时，浓度越高，相应荧光强度越高，若要降低荧光强度，可将荧光标记GelMA 与普通GelMA按一定比例混合使用。

注意事项

1）溶液反复冻融会影响产品性能，尽量现配现用；

2）根据最终荧光强弱自行调节使用浓度，冻干粉为非无菌产品，若用于生物实验请过滤除菌；

3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 

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