罗丹明标记牛血清蛋白(TRITC-BSA)
| 英文名 | Bovine Serum Albumin-TRITC | ||
| 产品编号 | FS1421 | ||
| 产品分类 | 氨基酸及蛋白质 | ||
| 纯度 | ≥98% | 储存条件 | -20℃避光干燥 |
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产品简介 牛血清白蛋白(BSA),是牛血清中的一种球蛋白,包含607个氨基酸残基,分子量为66.446KDa,等电点为4.7。牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用。可以用FITC、TRITC荧光素实现白蛋白的荧光标记。 本品罗丹明标记牛血清蛋白(TRITC-BSA) Bovine Serum Albumin-TRITC是通过荧光素(通常是荧光素TRITC,四甲基罗丹明-5(6)异硫氰酸酯)与牛血清白蛋白(BSA)偶联,制成的一种常用荧光探针。该标记分子常用于生物化学研究中的成像、蛋白质结合分析、细胞摄取实验以及药物递送等应用。BSA作为一种稳定的载体蛋白,广泛用于各种生物学实验,而荧光素的标记则提供了高灵敏度的检测手段。 产品应用 1、用于细菌、病毒、梅毒螺旋体、钩端螺旋体等微生物的抗原或抗体检查。 2、用于临床自身免疫病的多种自身抗体荧光检查,如抗核抗体,抗心肌抗体等。 3、细胞因子等检查的荧光流式细胞仪测定。 4、白细胞分型抗原的免疫荧光染色。 5、免疫组织及免疫病理中抗原,抗体检查,如各种肿瘤抗原检查。 |
使用方法
1. 工作液配制
1.1 用无菌 PBS pH7.2‑7.4 或无血清培养基溶解干粉,轻柔颠倒,不要剧烈涡旋。
1.2 用0.22 μm 滤膜除菌(细胞实验必须过滤)。
1.3 现配现用1×PBS (pH7.2‑7.4) #FSH055溶解;4℃避光不超过 24 h,水溶液不建议长期保存。注意避光。
2. 细胞胞吞 / 示踪标准操作(活细胞,不提前固定)
2.1 细胞铺板,培养至合适密度,弃旧培养基,PBS 轻洗 1‑2 次。
2.2 加入含 TRITC‑BSA 的无血清培养基,常用工作浓度:50‑500 μg/mL;
【注】巨噬细胞常用100‑200 μg/mL;上皮细胞 50‑150 μg/mL,实际需根据文献梯度进行优化。
2.3 37 ℃,5 % CO₂孵育,时间梯度:15 min‑6 h(内吞早期‑晚期溶酶体)。
2.4 孵育结束,弃液,PBS 充分洗涤 3 次,洗去细胞膜表面未内化的 FITC‑BSA。
2.5 可选:4 % PFA 固定 10‑15 min;【注】:固定不能提前做,固定后蛋白无法被细胞摄取。
2.6 可共染溶酶体探针 LysoTracker Green(CAT#FS1339)、DAPI(CAT#FS1206);共聚焦成像, TRITC通道采集红色荧光。
对照组设置:①纯 BSA(无 TRITC)细胞对照,排除蛋白本身细胞效应;②不加 TRITC‑BSA,细胞自发荧光对照。
3. 固定通透样本(材料蛋白吸附、封闭验证)
3.1 材料 / 切片:PBS 稀释 TRITC‑BSA 100‑500 μg/mL,室温避光孵育 30‑60 min;
3.2 PBS 充分洗涤;抗淬灭封片观察。
测定意义:用于验证封闭效果TRITC‑BSA 与样本未封闭位点结合,荧光越强代表封闭越差。
4. 体内(小动物)
尾静脉 / 皮下注射,常用 5‑20 mg/kg;活体荧光成像检测蛋白分布、血管通透性、清除速率。
注意事项
1)溶液反复冻融会影响产品性能,尽量现配现用;
2)根据最终荧光强弱自行调节使用浓度,冻干粉为非无菌产品,若用于生物实验请过滤除菌;
3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。