PicoGreen dsDNA Reagent 双链DNA检测试剂

英文名 PicoGreen dsDNA Reagent
产品编号 FS1368
产品分类 荧光探针及染色
纯度 储存条件 2-8℃避光保存,亦可置于-20℃避光保存。至少1年有效。
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产品描述

Picogreen是一种极为灵敏的荧光核酸染料,(激发和发射波长Ex/Em:488/520nm)常用于双链DNA的定量检测。历来DNA浓度的测定在cDNA文库的构建,DNA亚克隆、PCR产物的估测等领域中具有重要意义,疫苗等生物制品中残留微量DNA的检测更是直接关系到人类的健康。

Picogreen dsDNA定量检测:Picogreen仅在与DNA双链结合后才发出荧光,且所产生的荧光与DNA浓度呈正比,在存在ssDNA、RNA和单体核苷酸的条件下,可以选择性地检测低至25pg/ml的dsDNA。该分析在三个数量级范围内呈线性,且几乎无序列依赖性,可以精确地测量多个来源的DNA,包括基因组DNA、病毒DNA、小量提取DNA或PCR扩增产物。

相比传统的方法,Picogreen dsDNA Quantitation Reagent定量具有以下优势:

①灵敏度高:数量级较UV吸光读数更敏感,可节省宝贵的样品;

②特异性强:在等摩尔的RNA存在的条件下,对dsDNA具有特异性;

③耐受性好:耐受较高浓度的盐、尿素、乙醇、氯仿、去垢剂、蛋白或琼脂糖,可以直接定量PCR扩增产物而无需从反应混合物中纯化DNA。

④易于使用——只需在样品中加入染料,等待5分钟,然后读数即可,且适用于96和384孔板;与大多数基于荧光的酶标仪和荧光计兼容。

⑤适用范围广:可适用于PCR的分析、芯片样品、DNA损伤分析、酶活性分析、基因组DNA定量以及复杂混合物中dsDNA的检测和病毒DNA定量等多种领域。

我司可根据用户需求提供多种规格的Picogreen双链DNA检测试剂(PicoGreen dsDNA Reagent),本品以溶于DMSO的母液形式提供,浓度为0.1mg/ml。也有提供成套试剂CAS#FSF0034)试剂盒内若按照2ml反应体系来计算(比色皿),10×100 µL规格可做200次反应;若按照200µl反应体系来计算(96孔板),10×100 µL规格可做2000次反应;单次反应体系取决于荧光检测仪器。

保存与运输方法

保存:2-8℃避光保存,亦可置于-20℃避光保存。至少1年有效。

运输:冰袋运输。

应用示例(荧光定量):

应用示例(picogreen的荧光染色)

文献来源1):Ho SS, Zhang WY, Tan NY, Khatoo M, Suter MA, Tripathi S, Cheung FS, Lim WK, Tan PH, Ngeow J, Gasser S. The DNA Structure-Specific Endonuclease MUS81 Mediates DNA Sensor STING-Dependent Host Rejection of Prostate Cancer Cells. Immunity. 2016 May 17;44(5):1177-89. doi: 10.1016/j.immuni.2016.04.010. Epub 2016 May 10. PMID: 27178469.

Fig. Genome-Derived DNA Accumulates in the Cytosol of Prostate Cancer Cells
(A) Murine TRAMP-C2, human DU145 and human PC-3 prostate cancer cells were labeled with antibodies against dsDNA (red) and the mitochondrial marker COX IV (green) in the presence of DAPI (blue). Z stacks were acquired by confocal microscopy and 3D iso-surface rendered using Imaris software to exclude mitochondrial and nuclear DNA.
(B) TRAMP-C2, DU145, and PC-3 cells were labeled with 3 ml/ml of the dsDNA-specific dye PicoGreen (green) for 1 hr and with 100 nM mitochondria-specific dye MitoTracker (red) for 30 min. Z stacks were acquired by confocal microscopy and 3D iso-surface rendered using Imaris software to exclude mitochondrial DNA.

附表 PicoGreen定量耐受的污染物列表

物质名称 最大耐受浓度 信号变化百分比
Salts
Ammonium acetate 50 mM 3% decrease
Sodium acetate 30 mM 3% increase
Sodium chloride 200 mM 30% decrease
Zinc chloride 5 mM 8% decrease
Magnesium chloride 50 mM 33% decrease
Urea 2 M 9% increase
Organic Solvents
Phenol 0.1% 13% increase
Ethanol 10% 12% increase
Chloroform 2% 14% increase
Detergents
Sodium dodecyl sulfate 0.01% 1% decrease
Triton X-100 0.1% 7% increase
Proteins
Bovine serum albumin 2% 16% decrease
IgG 0.1% 19% increase
Other Compounds
Polyethylene glycol 2% 8% increase
Agarose 0.1% 4% increase

 注意事项

1) Picogreen含DMSO(已知有毒试剂),操作时请注意防护。

2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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