SYBR Green I (10,000× in DMSO) 核酸凝胶染料

产品简介

SYBR Green I是一种结合于所有dsDNA双螺旋小沟区域的具有绿色激发波长的染料。在游离状态下，SYBR Green I发出微弱的荧光，但一旦与双链DNA结合后，荧光大大增强。因此，SYBR Green I的荧光信号强度与双链DNA的数量相关，可以根据荧光信号检测出PCR体系存在的双链DNA数量。SYBR Green I 的最大吸收波长约为497nm，发射波长最大约为520nm。

采用琼脂糖电泳检测双链DNA时，SYBR GreenⅠ是最灵敏的荧光染料，当其结合到核酸上时，会产生很强的荧光及高量子产额，DNA/SYBR GreenⅠ复合物的量子产额均为0.8。由于与核酸结合后能产生很强的信号，背景极低，并且对核酸的亲和力高，因此SYBR染料可在低浓度条件下使用。SYBR GreenⅠ的最低检出限：20pg DNA(254nm); 60pg DNA(300nm 紫外透射)；此外，SYBR GreenⅠ还可以用于检测寡核苷酸(1-2ng,300nm 紫外透射)，比EB灵敏20至100倍。   SYBR GreenⅠ用于电泳检测DNA时，既可预染，也可电泳后再进行染色。SYBR GreenⅠ用于琼脂糖电泳检测DNA后，可直接将DNA转移至膜上，进行后续核酸印迹杂交反应。此外，SYBR GreenⅠ与DNA的结合对多种常用的限制性内切酶活性无抑制作用，可直接进行消化或连接。

使用方法

该产品使用方法同EB.点染法：用于琼脂糖凝胶电泳：取原液1ul加入TE缓冲液或灭菌双蒸水1ml，再加入6×DNA Loading buffer上样缓冲液1ml混匀，(此时溶液为1：2000稀释，即为工作液)电泳时取1-2ul工作液和5ul电泳样品混匀后静置5min后直接上样。 胶染法：常规配置琼脂糖凝胶100ml，加热至融化，待温度将至50-70℃（感觉不烫手）加入该原液10ul。待胶凝固后即可电泳，电泳结束后即可在紫外照射下观察。

注意事项

1）SYBR GreenⅠ应避光存放，原液保存于-20℃；建议分装冻存，短期可以4℃保存。

2）胶染法灵敏度较高，须将商品化的DNA marker稀释5-10倍后使用。

3）在预染色方法中，电泳时间不要超过2小时，否则SYBR GreenⅠ会从DNA上分离出来，会产生弥散状条带。

4）在常规用酒精沉淀核酸的过程中，SYBR Green I 可以全部从双链核酸上去掉。

5）在紫外照射透视下，与双链 DNA 接合的 SYBR Green I 呈现绿色荧光。如果胶中含有单链 DNA 则颜色为橘黄而不是绿色。

6) SYBR Green对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。

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