【产品概述】
简石生物通用基因组DNA小量提取试剂盒是一款设计灵活、应用广泛的核酸提取产品,专门用于从多种复杂生物样本中快速、高效地纯化高质量基因组DNA。它采用优化的蛋白酶K消化结合硅胶膜柱纯化技术,可处理包括固体组织、全血、细胞、毛发乃至保存在特殊介质中的样品。获得的基因组DNA片段大、纯度高,可直接用于PCR、酶切、测序等多种下游分子生物学实验。
【产品核心亮点】
样品来源极其广泛:一款试剂盒即可兼容固体组织(如心、肝、脑、肾等)、多种生物体液(全血、唾液、精液等)、培养细胞、毛发以及保存在保护剂或 Guthrie/FTA卡上的样品,通用性极强。
高纯度与大片段回收:可有效回收大于50 kb的基因组DNA,纯度优异(A260/A280 ≥ 1.8, A260/A230 ≥ 2.0),能同时回收样品中可能存在的线粒体DNA、病毒DNA等。
高产量与稳定性:从哺乳动物组织中可获得高产量DNA(如每mg肝、肾、肺组织可提取3-5 μg DNA),且操作流程稳定可靠,重复性好。
灵活的附录方案:针对头发/毛发、有核血液、口腔细胞、单层培养细胞以及保存在EZshield®保护剂中的样品,提供了详细、优化的专属操作流程附录,解决特殊样本的处理难题。
【详细产品特性】
适用样品类型:
液体样品:≤200μl全血、有核血、唾液、痰、精液、乳汁、血清/血浆(用于病毒DNA提取)等。
细胞样品:≤5x10⁶个哺乳动物或昆虫培养细胞(如HeLa、HEK-293)。
固体组织:≤25mg的尾巴、耳朵、器官活检组织(脑、肝、心、肾等)。
特殊样品:头发/毛发、口腔脱落细胞、保存在DNA/RNA保护剂(EZshield®)或 Guthrie/FTA卡上的样品。
不适用于:小片段DNA或游离DNA(cfDNA)的提取(推荐使用TD476产品)。
DNA产量与纯度:
产量:从哺乳动物组织如心脏、脑中可提取1-3 μg DNA/mg组织;从肝、肾、肺中可提取3-5 μg DNA/mg组织;从100μl全血中可回收≥3 μg DNA。
纯度:A260/A280 ≥ 1.8,A260/A230 ≥ 2.0,可直接用于PCR等敏感实验。
DNA片段大小:可回收到大于50 kb的基因组DNA。
所需设备:水浴锅或金属浴(55℃)、微型离心机、涡旋仪。
TD468 通用基因组 DNA 小量提取试剂盒 高频 FAQ(10 条核心要点)
1. TD468 适用哪些样品?不推荐提取哪种 DNA?
本品为通用型基因组 DNA 提取试剂盒,适配固体组织、全血、培养细胞、毛发、口腔细胞、保存卡 / 保护剂样品等复杂样本;不推荐提取游离 DNA/cfDNA,游离 DNA 提取建议选用 TD476 试剂盒。
2. 首次使用需配制哪些试剂?蛋白酶 K 如何配制保存?
仅需配制蛋白酶 K:将 1060μl 蛋白酶 K 保存液加入 20mg 蛋白酶 K 干粉,混匀配成终浓度 20mg/ml 的工作液,-20℃ 分装保存;其余试剂均为即用型,无需预处理。
3. 液体样品与固体组织的操作核心差异是什么?
液体样品(全血 / 细胞):加通用消化液 + 蛋白酶 K,55℃孵育 10 分钟,加 1 倍体积 结合液;
固体组织:加水 + 消化液 + 蛋白酶 K,55℃孵育 1-3 小时,加 2 倍体积 结合液。
4. 可提取的基因组 DNA 片段大小与产量参考?
片段大小:稳定回收 >50kb 高分子量基因组 DNA,同步回收线粒体 / 病毒 DNA;
产量参考:
• 100μl 全血 ≥3μg
• 1mg 肝 / 肾 / 肺组织 3-5μg
• 1mg 心 / 脑组织 1-3μg
5. 低温下消化液 / 洗涤液出现沉淀还能使用吗?
可以正常使用;将试剂 37℃水浴加热数分钟 至沉淀完全溶解,冷却至室温后即可使用,不影响裂解、结合与回收效率。
6. 2 号 C-XLR 纯化柱的结合容量?如何提升洗脱回收率?
最大结合容量:适配常规小量基因组 DNA 提取需求;
洗脱优化:
1. 洗脱液 65-70℃ 预热,滴加在柱膜中央;
2. 室温静置 2-5 分钟 再离心;
3. 大体积组织可增加洗脱液至 200μl。
7. 头发、保存卡等特殊样品如何处理?
毛发样品:添加 DTT 辅助裂解,55℃孵育 1-3 小时(可过夜);
保存卡样品:配合专用裂解管 + 裂解液,振荡匀浆后按流程提取,详见附录 E。
8. 提取的 DNA 纯度如何?可直接用于哪些下游实验?
纯度指标:A260/A280 ≥1.8,A260/A230 ≥2.0,无蛋白 / 盐类 / 抑制剂污染;
下游适用:酶切、PCR、高通量测序、基因分型、分子杂交等所有分子生物学实验。
9. 保存在 DNA/RNA 保护剂中的样品如何操作?
液体样品:加蛋白酶 K 室温孵育 20 分钟,直接加结合液过柱;
固体组织:加消化液 + 蛋白酶 K 55℃孵育 1-3 小时,加结合液纯化,无需去除保护剂。
10. DNA 产量低、纯度差、下游 PCR 失败如何快速排查?
消化不足:延长孵育时间,固体组织建议过夜消化;
结合不充分:严格按比例加结合液,确保充分混匀;
乙醇残留:严格执行洗涤后空转离心,彻底去除乙醇;
样品过载:固体组织 ≤25mg,液体样品 ≤200μl,避免过载。