尿液DNA提取试剂盒（离心柱）

【产品概述】

简石生物尿液DNA提取试剂盒是一款专门用于从尿液样本中高效、可靠地纯化细胞DNA与游离DNA（cfDNA）的创新产品。其最大特点是可处理高达40毫升的大体积尿液，并配备了独特的尿液稳定剂（UCB），使样本能在室温下稳定保存长达一个月。该试剂盒采用优化的沉淀、消化与柱纯化流程，提取的DNA纯度高，适用于qPCR、DNA测序、芯片分析和DNA甲基化分析等高灵敏度下游应用。

【核心产品亮点】

大体积处理与室温稳定：可处理高达40毫升的尿液样本，显著提高DNA得率。独有的尿液稳定剂（UCB）能使尿液样本在室温下稳定保存长达1个月，极大方便了样本的采集、运输与储存。

高兼容性与高纯度：能从尿液中同时高效回收细胞DNA和游离DNA，回收片段范围广（100 bp 至 23 kb）。纯化柱设计确保去除抑制剂，获得的DNA适用于所有敏感的下游分子应用。

灵活的应用方案：提供完整的操作流程，可同时提取总DNA（细胞内+游离），也可根据附录方案分别选择性提取细胞内DNA或游离DNA，满足不同研究需求。

完整的解决方案：针对尿液中可能存在的难以裂解的微生物（如革兰氏阳性菌、真菌），提供了附录方案，通过搭配裂解管、裂解液等补充组件（需另行订购）进行机械破碎，确保DNA的充分释放。

【详细产品特性】

样品来源与用量：尿液样本，每次处理最多40毫升。可根据需要按比例放大或缩小处理体积。

DNA产量：纯化柱的DNA结合容量为5 μg。实际DNA产量因个体差异和尿液体积而异。健康男性尿液DNA平均范围约为2-20 ng/ml，健康女性约为6-1000 ng/ml。DNA产量随尿液处理量的增加而线性增加。

DNA片段大小：能够回收100 bp 到 23 kb的DNA片段。

DNA质量：提取的DNA质量高，适用于PCR、亚硫酸盐处理/甲基化检测、芯片分析、测序等。

样本稳定性：添加UCB后，尿液中的总DNA（细胞+游离）在室温下保存29天后，经qPCR检测仍保持稳定。

所需设备：离心机（可处理15ml/50ml离心管）、微量离心机、水浴锅或金属浴（55℃）。

TD361 尿液 DNA 提取试剂盒（离心柱）高频 FAQ（10 条核心要点）

1. TD361 可处理哪些样本？单次最大处理量是多少？

本品专为尿液样本设计，可同时提取细胞 DNA + 游离 DNA（cfDNA），单次最多处理 40ml 尿液，也可按比例处理 1-40ml 任意体积尿液。

2. 尿液稳定剂（UCB）的核心作用是什么？样本能保存多久？

尿液稳定剂兼具 DNA 沉淀 + 常温保护双重功能，添加后尿液 DNA 可在室温稳定保存 1 个月，无需冷冻运输 / 储存，大幅提升尿液样本的便携性与稳定性。

3. 首次使用需完成哪些试剂配制？洗涤液 2 的配比是多少？

尿液 DNA 洗涤液 2：12ml 试剂 + 48ml 无水乙醇（或 52ml 95% 乙醇），添加后做好标记，避免重复加醇；

蛋白酶 K 溶液为即用型，无需额外配制，-20℃保存即可。

4. 如何单独提取尿液细胞内 DNA 或游离 DNA？

细胞内 DNA：先离心尿液取沉淀，直接进行消化 + 纯化步骤；

游离 DNA：先离心取上清，再加 UCB 稳定剂、纯化珠沉淀后，按流程消化纯化。

5. 1 号 C-S 纯化柱的结合容量？可回收 DNA 片段范围是多少？

最大结合容量：5μg DNA；

片段范围：可稳定回收 100bp–23kb 的 DNA 片段，覆盖细胞基因组 DNA 与短片段游离 DNA。

6. 如何提升尿液微量 DNA 的洗脱回收率？

1. 洗脱液 65–70℃ 预热，直接滴加在纯化柱基质中央；

2. 加样后室温静置 3–5 分钟，延长 DNA 洗脱时间；

3. 最小洗脱体积 ≥10μl，可二次洗脱提升总回收量。

7. 低温下消化液 / 裂解液出现沉淀还能使用吗？

可以正常使用；将试剂 37℃水浴加热数分钟 至沉淀完全溶解，冷却至室温后即可使用，不影响 DNA 裂解、结合与回收效率。

8. 尿液中含革兰氏阳性菌、真菌等难裂解样本该如何处理？

按附录 B 操作：使用 0.1&0.5mm 裂解管 + 样品破碎仪 充分裂解，配合 3 号 F 纯化柱 过滤杂质，再进行常规 DNA 纯化，确保难裂解样本的 DNA 完全释放。

9. 提取的尿液 DNA 纯度如何？可直接用于哪些下游实验？

DNA 纯度高、无抑制剂残留，可直接用于 qPCR、DNA 测序、基因芯片、甲基化分析、基因突变检测 等高精度分子实验。

10. 尿液 DNA 产量低、下游实验失败该如何快速排查？

样本：未添加 UCB 稳定剂，DNA 常温降解；

沉淀：离心参数不足，DNA / 细胞沉淀不充分；

消化：55℃孵育时间不足，样本消化不彻底；

残留：未彻底去除洗涤液乙醇，抑制下游酶反应。