Taq DNA Polymerase

英文名 Taq DNA Polymerase
产品编号 FSF0030
产品分类 工具酶
纯度 2.5U/μǀ 储存条件
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产品简介

Taq DNA Polymerase简称Taq酶,是最常用的DNA聚合酶之一。Taq DNA Polymerase 是从含有 Thermu aquaticus DNA Polymerase 基因的大肠杆菌经诱导表达后分离纯化的热稳定蛋白,其分子量为 94 KD。Taq DNA Polymerase 具有 5'-3'DNA 聚合酶活性和 5'-3'外切核酸酶活性,无 3'-5'外切酶活性。在 PCR 反应中,Taq DNA Polymerase 延伸速度为 1-2 kb/min,产物3'端带 A,可直接用 TA 载体克隆。

活性定义:1单位(U) Taq DNA Polymerase 活力定义为在74℃、30min 内,以活性化的大马哈鱼精子 DNA 作为模板/引物,将 10 nmol 脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。

酶储存缓冲液:100 mM KCl,20 mM Tris-HCl (pH 8.0),0.1 mM EDTA,1 mM DTT,蛋白稳定剂和 50%(v/v) 甘油。

10×Taq Buffer:10×Taq Buffer 含 KCl, (NH4)2SO4,15mM MgCl2,Tris-HCl(pH 8.3),0.5% Tween 20,0.5% NP40 和常规 PCR 增强剂。

质量控制:SDS-PAGE 检测纯度大于 99%;经检测无外源核酸酶活性,PCR 方法检测无宿主 DNA 和表达载体 DNA 残留, 能有效扩增人类基因组中的单拷贝基因。

使用方法

1,取本品室温解冻,也可提前放置于 2-8℃,解冻后翻转混匀。

体系成分 用量
模板 DNA *
Primer 1(10μM) 1μǀ
Primer 2(10μM) 1μǀ
dNTPs(10mM) 1μǀ
10×Taq Buffer 5μǀ
Taq DNA Polymerase(2.5U/μǀ) 1μǀ
ddH2O 补充至 50μǀ

 【注】:最佳反应体系和最佳反应条件应根据实际需要设定。

2,PCR 反应循环的设置:

95℃ 3 min

94℃ 30 sec

55℃ 30 sec           30 cycles

72℃ 1 min

72℃ 5 min

12℃ soak

3,结果检测:反应结束后取 5μǀ反应产物,琼脂糖凝胶电泳检测。

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