DRAQ5活细胞DNA染料(5mM in DMSO)

产品简介

DRAQ5是一种细胞通透性的远红外DNA染料，能联合其它常见的标记染料比如：GFP或FITC，用于固定或非固定/活细胞的染色。与任何其它细胞通透性的DNA嵌入染料一样，DRAQ5在长期实验中可能抑制细胞分裂，需测定染料可能的任何效应。

DRAQ5能用于流式细胞仪、活细胞成像和基于细胞的各种实验，DRAQ5高度兼容于许多仪器平台上的标准实验方案。

DRAQ5染色包含这些优势：

1）以便捷的即用型水溶性溶液形式提供；

2）能被活细胞快速摄取，提供高水平的细胞核辨别力；

3）无光漂白效应；

4）适用于绝大多数细胞，真核和原核来源：哺乳动物、细菌、寄生虫、植物等；

5）流式细胞检测中与常见的FITC/GFP+PE结合实验无需做荧光补偿；

6）不需要RNase处理；

7）与DNA结合后没有荧光增强，因此，测量的荧光与细胞内的核DNA量呈比例和化学计量比。测量不到mtDNA结合，与RNA结合可忽略。

8）兼容于台式流式细胞仪、激光扫描细胞仪和非紫外激光扫描和基于灯泡的共聚焦显微镜。

应用范围：活细胞成像，活细胞实时核标记与动态观察，细胞周期分析，活细胞的DNA标记，染色质超微结构研究等。

本品以5 mM in DMSO液体形式提供，按需稀释后即用，通常推荐细胞核染色一般在2.5-5 µM即可检测。【注】当实验需要连续监测，如EGFP标记蛋白的易位实验，DRAQ5染色液需要在加入激动剂/拮抗剂前0.5-3 h内加入，浓度为1 μM。

保存与运输方法:2-8°C避光保存，2年有效。不可冻存！室温运输。

产品特性

1）CAS 号:254098-36-7

2）化学名称：1, 5-bis{[2-(di-methylamino)ethyl]amino}-4, 8-dihydroxyanthracene-9, 10-dione 1,5-双{[2-(二甲基氨基)乙基]氨基}-4, 8-二羟基蒽-9,10-二酮

3）分子量：412.54

4）激发波长：最理想647nm处（Eλmax= 646 nm）； 次理想488，514，568和633nm处

5）发射波长（取决于仪器）：665nm至红外（Emλmax= 681nm/697nm，掺入 dsDNA）

         与可见光区比如：GFP和FITC，最小重叠；发射滤片可能包括：695L, 715LP 或780 LP

染色步骤

1）用不含有叠氮化钠的PBS缓冲液或实验体系的细胞培养基重悬细胞，细胞密度≤4×10⁵个/mL（如2~4×10⁵个/mL密度）

2）PBS清洗细胞两次。叠氮钠影响DRAQ5染色，建议用PBS（不含钙镁或叠氮钠）或细胞培养基来染色。

3）稀释DRAQ5到所需浓度。推荐做浓度滴定来确定最佳的工作浓度。用于流式细胞仪和显微成像检测， 1:200~1:1000的稀释倍数（5-25µM）能获得良好的染色结果。

4）室温避光孵育10-15min。

5）用装有633红色激发器的细胞仪进行细胞分析。做细胞周期分析时，用带680LP或715LP滤片的Alexa 700通道可能有助于分辨发射峰。

【注】荧光检测：

1. 流式细胞术：活细胞成像分析，在488 nm处激发这种染料时，可使用685 LP二向分色镜和710/50通道进行检测；在633 nm处激发时，可使用660/20通道进行检测。细胞周期/DNA分析，建议使用波长较长的滤光片，如735 LP二向分色镜和780/60通道来优化G1和G2/M峰的CV值。

2. 成像显微术：建议使用633 nm或647 nm光源进行激发检测。

注意事项

1）DRAQ5（5mM）不可冻存，但冻存会导致染料析出，且很难（不可能）重溶回溶液。

2）DRAQ5是Biostatus Limited的商标名。

3）荧光染料都存在淬灭的问题，保存和操作过程中注意避光。

4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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