Mag-Fluo-4 AM, Cell Permeant镁离子荧光探针

产品简介

具细胞膜渗透性的Mag-Fluo-4 AM是Fluo-4 AM（货号：FS1221）的一种结构类似物，对镁离子（Mg2+）和钙离子（Ca2+）的Kd值分别是4.7mM和22µM，是一种非常有用的细胞内镁离子指示剂和低亲和性钙离子指示剂。

运输与保存方法:冰袋运输。-20℃避光干燥保存， 1年有效。

产品特性

同义名：Mag-Fluo-4 acetoxymethyl ester, cell permeant

分子式：C₃₇H₃₃F₂NO₁₈

分子量：817.65 g/mol

外观：橙色固体

纯度：≥90%

Ex/Em：494/516 nm

溶解性：溶于DMSO

产品优势

1）镁离子指示探针

Mag-Fluo-4与Thermo（invitrogen）公司的Magnesium Green indicator相比，具更加灵敏的Mg2+荧光反应。由于细胞内Mg2+的生理波动幅度通常很小，这一点点灵敏度的提高都是值得考虑的优势。与Fluo-4一样，Mag-Fluo-4在不含二价阳离子的情况下基本无荧光，一旦与Mg2+结合后，呈明显的荧光加强，但无光谱迁移（见下图）。

图. Mag-Fluo-4在0-50mM Mg2+溶液内的荧光发射光谱

2）钙离子指示探针

Mag-Fluo-4是Fluo-4的类似物，具有更低钙离子结合亲和性，特别适合用于检测1 µM~1 mM范围内的胞内钙离子水平。

使用方法

1. 储存液制备

取一管低温保存的Mag-Fluo-4 AM，置于室温回温至少20min。之后加入高质量无水DMSO配制成1~5mM储存液，比如50μg Mag-Fluo-4 AM（Mw：817.65 g/mol）溶于12μl DMSO，充分溶解后，即得到5mM储存液。【注意】未使用的储存液分装储存在-20℃，避免反复冻融，且要避光保存。尽快使用完。

2. 操作步骤

【注意】以下使用方法仅作参考，需根据具体的细胞类型和实验要求做出调整。

使用方法（细胞内镁离子水平的流式检测）：

1）用生理培养液（120 mM NaCl, 20 mM HEPES, 4.7 mM KCl, 1.2 mM KH2PO4, 1.2 mM MgSO4, 1.25 mM CaCl2, and 10 mM glucose）于37℃预孵育BMMSCs细胞10min使其达到离子梯度的稳定和平衡；

2）用DMSO配制Mag-Fluo-4-AM储存液1mM；

3）取4ul Mag-Fluo-4-AM储存液（1mM）和5ul 20% F-127，加入1ml培养基内，充分混匀；

4）取0.25ml 分散液加入0.75ml含细胞培养液，使得探针终浓度为1uM；继续孵育30min，之后清洗细胞3次，之后再孵育30min保证细胞内AM基团的*去酯化；

5）之后用流式细胞仪分析荧光强度（Ex/em:480/520nm）。

注意事项

1）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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