无血清无蛋白细胞冻存液

产品简介

通用型无血清细胞冻存液；可用于各种动物细胞株和大部分的干细胞。配方不含动物来源性蛋白，不含血清，可减少各类细菌、病毒和支原体等污染，保证冻存细胞的安全。有效提高各类干细胞的复苏存活率，而不影响其染色体组形、增殖能力和分化能力。该冻存液含DMSO、葡萄糖等各种细胞营养成分，提高细胞存活率和活力，亦适合于无血清培养细胞和蛋白表达细胞。冻存细胞可在-80℃长期保存，细胞存活率可达90%以上。

基本特性

① 应用范围广：各种动物细胞（肿瘤细胞、常规细胞胚胎干细胞 、诱导多能干细胞、间充质干细胞等）。​

② 使用方便： 即用型（无需程序性降温，无需冻存盒，无需放液氮,省事省力省时间）。

③ 安全性高：不含异源动物成分，提高细胞存活率和活力，降低病毒，病菌和支原体污染可能性。

④ 存储条件：-20℃保存，3年有效。+4℃保存，1年有效。

使用方法

选细胞冻存步骤

（1）按照常用方法收集悬浮细胞或贴壁细胞于试管中。
（2）按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存细胞数。（参考：5×10⁵ 至 5×10⁶ cells/ml）。

（3）取相当于所需细胞数的细胞悬浮液量，置于离心管中，离心收集培养细胞(参考离心条件：1,000~2,000rpm，4°C，3至5分)。移去离心管中的上清液。
（4）加入适量的细胞冻存液于离心管中，使细胞浓度为 5×10⁵ 至 5×10⁶ cells/ml。缓慢地混合均匀，制成细胞混合液。
（5）将离心管中的细胞混合液分装于已标示完全的冷冻保存管中。
（6）直接将含细胞混合液的冻存管放入-80°C冰箱，长期冷冻保存。

（7）若需要液氮保存时，可将完全冻结的冻存管（放入-80°C冰箱后至少一天时间）移至液氮罐中。

操作示意图

冻存细胞复苏步骤

1. 从冰箱中取出冻存的细胞，立即放入37℃水浴槽中快速解冻。

2. 待冻存管中细胞混合液完全融化后，立即加入1ml细胞培养基于冷冻管中与细胞混合，将其中的混合液移至含有约5ml该细胞培养基的离心管中，1000rmp，5分钟离心收集冻存细胞沉淀，移去上清液（操作时小心，切勿将细胞沉淀移去）。

3.加入适量的新鲜细胞培养基，使用移液管缓缓加入到细胞沉淀，轻柔地混匀，将细胞混合液移至事先准备好的培养容器中。

4.镜检细胞后，可根据各自研究的需要和方法经行细胞常规培养。

已经验证过的细胞

目前已经验证细胞：Hela，HEK-293T,HuUMSCs、mESCs、C3H10、mNSCs-11、Mmmsc-11、A549、NCI-H460、PC12、RAW264.7、C2C12、DU145、NIH-3T3、BMSC、COS7、CHO、MDCK等60余种。

不同细胞冻存密度推荐参考下表：

注意事项

（1）冻存细胞分装后，应减少在外存放时间，尽快移入到-80 ℃超低温冰箱。

（2）本产品含有5%DMSO，部分对DMSO敏感的细胞，建议对其进行至少1周的本产品试验性的细胞冻存培养，确认性能后再正式冻存。

（3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。