Trypan Blue Staining Cell Viability Assay Kit 台盼蓝细胞活力检测试剂盒

产品简介

 台盼蓝（Trypan blue)又锥蓝或锥虫等，分子式为C34H24N6NA4O14S4，分子量为960.81，CAS Nunber72-57-1,是一种阴离子型染料。这种染料不能透过活细胞正常完整的细胞膜，故活细胞不着色，但死亡细胞的细胞膜通透型增加，可使染料通过细胞膜进入细胞内，使死细胞着色呈蓝色，是最常用的检测细胞活率的方法。通常认为细胞膜完整性丧失，即可认为细胞已死亡，这与中性红作用相反。因此，借助台盼蓝染色可以非常简便、快速的区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。

 台盼蓝染色细胞存活率检测试剂盒( Trypan Blue Staining Cell Viability Assay Kit)是一款简易的细胞存活率检测试剂盒,含实验所需的台盼蓝染色液和细胞重悬液。操作简单快捷。

产品组成

存储条件：4℃保存，一年有效。【注】如有沉淀，放置37℃水浴锅后使用。

自备材料

1、PBS

2、胰蛋白酶消化液

 2、细胞计数板

 3、光学显微镜

操作步骤（仅供参考）

1、收集细胞：

 如果收集贴壁细胞，应用胰蛋白酶-EDTA溶液消化细胞，收集细胞。如果收集悬浮细胞，则可以直接收集细胞。把收集的细胞在1000~2000g离心1min,弃上清，用1mlPBS重新悬浮起细胞沉淀。

2、台盼蓝染色：

 吸取100ul重悬的细胞常规1.5ml和0.5ml离心管内，加入100ul Trypan blue Stain(0.4%)轻轻混匀，染色3min(染色时间可适当延长，但不宜超过10min)。

3、细胞计数：

 吸取少量染色细胞到血球计数板内,于普通光镜10x物镜下计数四个大格内的细胞数,压线者数上不数下,数左不数右,分别记录着色细胞(包括损伤细胞和死细胞)

和未著色细胞(活细胞)。

[注] : 用移液枪加样,沿着盖玻片的边缘轻轻加液使其完全覆盖住整个小室。不宜过量或量太少。

[注] : 每个细胞样品至少需数500个细胞,数出蓝色细胞和细胞总数。

细胞存活率计算公式如下：

             细胞存活率=（细胞总数-蓝色细胞数）/细胞总数*100%

[注意] : 处于健康的对数生长期细胞，通常情况活细胞至少占到95%。

注意事项

1）Trypan blue stain对人体有轻微毒性，请注意小心防护。

2）试剂是无菌的使用时最好在超净台内进行无菌操作，避免细菌污染。

3）注意凋亡小体偶尔也有台盼蓝拒染现象。

4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。