胰蛋白酶（TPCK处理）（组织培养级）

产品描述

胰蛋白酶（胰酶，Trypsin），来源于胰腺的一种丝氨酸蛋白酶，由223个氨基酸残基组成的单链多肽，底物特异性是带正电荷的赖氨酸和精氨酸侧链。胰酶主要切割赖氨酸和精氨酸羧基端，当两者之一紧随为脯氨酸的情况除外。另外，当切割位点任一边紧邻酸性残基，胰酶水解速率也会减缓。

胰蛋白酶（胰酶，Trypsin），以无活性的胰蛋白酶原（Trypsinogen）形式分泌于胰腺中，通过切割其末端六肽而得到活化，产生天然单链形式的β-胰酶（β-Trypsin），随后进行有限的自发裂解产生具水解活性的α-Trypsin（由二硫键共价连接的二条肽链组成）。胰酶水解活性可被多种化合物所抑制，有1）来源于胰腺、大豆、青豆、蛋清的天然胰蛋白酶抑制剂；2）银离子；3）有机磷化合物，如氟磷酸异丙酯DFP；4）特定蛋白酶抑制剂，如AEBSF、抗蛋白酶、抑肽酶、PMSF、TLCK等；

胰蛋白酶的用途广泛，包括1）组织消化，需要配合其他蛋白酶如胶原酶和弹性蛋白酶一起使用；2）胰酶消化以收集细胞；3）线粒体分离；4）体外蛋白研究；5）从塑料或者玻璃培养表面消化以去除单细胞层；6）多种血细胞凝集过程；7）流式DNA分析的样品制备；8）胰酶消化肽图谱；9）指纹和测序研究；10）环境监测；11）降低组织培养的细胞密度；12）细胞亚培养；13）融合蛋白切割；14）纯化糖蛋白内消化得到糖肽。

本品为经TPCK（N-tosyl-L-phenylalanyl chloromethyl ketone,甲苯磺酰基-L-氨基联苯氯甲基酮）处理的胰蛋白酶，有效抑制胰蛋白酶制备过程中残留的糜蛋白酶活性。细胞培养级，适用于细胞传代。本品以冻干粉形式提供，比活力≥10,000 BAEE units/mg protein。

胰蛋白冻干粉产品常遇到的活性定义及其转换:

1 BAEE Unit：在25℃，pH 7.6 的条件下，以BAEE为底物，3.2 ml的反应体系中，A253吸光值每分钟会发生0.001的变化即为一个酶活单位。

1 TAME Unit： 在25℃，pH 8.2，0.001M Ca2+条件下，每分钟水解 1μmol p-toluenesulfonyl-L-arginine methyl ester（TAME）的用量。

1 USP Unit：在指定条件下，每分钟引起吸光值发生0.003的变化的样品活性。

1 TAME unit = 19.2 USP or NF units = 57.5 BAEE Unit

产品特性

1） EC NO：3.4.21.4

2） CAS NO：9002-07-7

3） 同义名：Trypsin, from porcine pancreas, TPCK Treated; Tryptase; Tryptar; Cocoonase; Parenzyme; Parenzymol; 胰酶，来源于牛胰腺，TPCK处理；

4） 分子量：23.4 kDa

5） 外观：白色或者微黄色结晶粉末

6） 溶解性：溶于1mM HCl（1mg/ml）

7） 比活力（胰蛋白酶）：≥10,000 BAEE units/mg protein

8） 比活力（糜蛋白酶）：≤0.1 BTEE units/mg protein

保存与运输方法:2-8℃干燥保存，3年有效。冰袋运输。

使用方法

1. 产品溶解

储存液制备：溶于1mM HCl（pH 3）配制母液，充分溶解，-20℃分装冻存，至少稳定保存~1年。加入Ca2+（20mM）能延缓胰蛋白酶的自溶和维持胰蛋白酶在溶液内的稳定性。

稳定性：胰蛋白酶在2.0M 尿素，2.0M 盐酸胍或0.1%（w/v）SDS维持绝大多数活性。在高pH（＞11）下不可逆变性，或添加三氯乙酸 （TCA，终浓度10%）沉淀样品，或加入高浓度尿素（＞6.5M）变性。为了去除所有胰蛋白酶活性，在1%（w/v）SDS下于100℃至少加热5min。

2. 产品用法

使用时，将pH 7~8的合适缓冲液将储存液稀释到工作浓度。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。