Human DiI-Ox-LDL人源红色荧光标记氧化型低密度脂蛋白

产品简介

低密度脂蛋白（Low Density Lipoprotein，简称为LDL）由极低密度脂蛋白（VLDL）转变而来，主要功能是把胆固醇运输到全身各处细胞，运输到肝脏合成胆酸，其可用于研究受体介导的内吞作用过程，尤其是在动脉粥样硬化等疾病中，血浆来源的LDL可用于研究LDL在功能和代谢中的氧化作用。LDL是一个大蛋白，分子量3500 Da，直径25.8 nm，由20-25%的蛋白质和75-80%的脂类组成。其中脂质部分又由9%游离胆固醇，42%胆甾醇酯，20-24%磷脂和5%甘油三酯共同组成。

本品为红色荧光标记的氧化型人源低密度脂蛋白(HumanDil-Ox-LDL)，是标记荧光探针Dil( I,I'-dioctadecyl-3 ,3,3,3'- tetramethyl-indocarbocyanine perchlorate)的Ox-LDL，可以标记血管内皮细胞和巨噬细胞，可用来鉴定并分选这些细胞，以及用来研究不同细胞系对修饰化LDL的内吞作用。我司提供的Dil-Ox-LDL,每个批次均经过牛大动脉内皮细胞和小鼠巨噬细胞的标记检测来评估产品的标记特异性，从而保证结果的一致性。本品Human Di-Ox-LDL为无菌包装，可以直接稀释使用。除提供Dil-Ox-LDL，我们还提供不带标记的Ox-LDL, Ac-LDL (乙酰化修饰)以及不经修饰的LDL等。

运输与保存方法：冰袋运输；4℃无菌，建议避光，收到货后稳定保存6周。切忌冻存！

产品属性
纯度：＞98%
浓度：0.8～ 3.0 mg/ml
外观：乳状液体
缓冲液组分：0.01 µM EDTA in PBS, pH 7.4

实验步骤

1)无菌条件下，将Human DiI-Ox-LDL用细胞培养基稀释至20-40 μg/ml。

2)加入活细胞内，37°C培养3-6小时。

3)孵育结束，吸去含有Human Di-Ox-LDL的培养基，并用无探针的培养基洗几次。

4)根据实验需求用荧光显微镜或流式细胞仪检测。

a)荧光显微镜观察

采用标准的罗丹明激发:发射滤光片( 或建议使用波长为: Ex/Em=549nm/565nm) ;若需要请使用含3%甲醛的PBS进行固定，切勿使用甲醇或丙酮固定，因Dil易溶于有机溶剂。

【注：】需设阳性细胞以做对照。

b)细胞分选(流式细胞术)

胰蛋白酶处理细胞或者加入EDTA制成单细胞悬液，选用合适的已标记纯化细胞用作阴性和阳性对照，从而进行流式分选设门(gate) ( 建议使用波长为Ex: 488/514/549nm; Em:565nm)。

注意事项
1）本品的稀释工作液极不稳定，建议即配即用；
2）长期贮存可能会有沉淀析出，属于正常现象，低速离心2 min去除沉淀即可使用；
3）LDL与LDL受体的结合需要Ca2+和Mn2+的参与，过量EDTA的存在会抑制其结合；
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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