IPTG 异丙基-beta-D-硫代半乳糖吡喃糖苷
| 英文名 | Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside | CAS号 | 367-93-1 |
| 产品编号 | FS0373 | 分子式 | C9H18O5S |
| 产品分类 | 核酸电泳系列 | 分子量 | 238.3 |
| 纯度 | ≥99%(HPLC) | 储存条件 | -20℃ |
产品描述:
IPTG,英文全名Isopropyl-beta-D-thiogalactoside,中文全名异丙基-β-D-硫代半乳糖苷,诱导细菌lac或tac操纵子调控的基因转录,尤其是水解酶β-半乳糖苷酶(β-gal,beta-gal)。一旦表达,β-gal水解β-半乳糖苷和乳糖为单糖。IPTG通常用于β-gal活性分析,当含大肠杆菌来源lacZ基因的载体转染进入细胞后,编码表达β-gal,细胞裂解后,通过催化底物ONPG的颜色反应即可定量分析活性。IPTG也是硫代半乳糖苷转乙酰基酶的底物,文献报道还能诱导合成细菌青霉素酶。体内研究IPTG的一个重要优势在于,IPTG不会大肠杆菌所代谢,IPTG浓度和lac p/o控制基因表达都保持稳定。
IPTG普遍用在需要诱导β-gal活性的克隆步骤中,为常见的就是和X-gal联合使用进行蓝白斑克隆筛选,或与Magenta-gal联合使用进行红/白斑克隆筛选。
作用机理: 当目的基因插入载体lacZ基因,破坏β-gal表达并阻止其表达。细菌在含X-gal的培养基上生长,β-gal水解此底物生成一不可溶蓝色产物,菌落呈蓝色。若β-gal不能表达,细菌克隆则无法催化X-gal底物,菌落呈白色,以此区分转化重组载体或非重组载体的克隆子。
IPTG也可用于重组蛋白的诱导表达。在这些体系中,待研究蛋白在IPTG诱导型启动子下游编码。IPTG诱导待研究蛋白表达,对细胞裂解后,使用一系列合适方法来纯化蛋白,如His-tag或GST-tag纯化系统(融合相应标签的重组蛋白)。
外观:白色结晶粉末;杂质:≤0.1% Dioxane(二氧六环);溶解性:溶于水、乙醇