发布日期:2020-11-26 9:22:37
线性PEI溶液的配制方法

线性化聚乙烯亚胺(简称:线性PEI)分两种分子量25K和40K。
两者
区别:
1)PEI 25K转染溶液通常需要几个小时才能制备,PEI 25K含有4-1 1%的残余丙酰基,可防止聚合物主链与DNA强烈结合。
2)PEI MAX 40K完全水解(完全去乙酰化的结构意味着每批产品的表现始终如),可以在两个小时内转化为即用型溶液。
3)PEI MAX 40K比PEI25K更易于使用,并且更高效,含更长连续性乙烯亚胺片段,其质子化氮水平比PEI25000提高11%以上。

分下面分别推荐一种简单适用而高效的方法,讲述如何配制浓度为lmg/mL的转染试剂的配制。

提前准备器材:
1 L玻璃烧杯、1 L玻璃量筒、pH计、移液器、磁力搅拌棒、带油管的真空泵
1g的PEI 25K #FSF0001或者1g的PEI MAX 40K#FSF0002、IL纯水(Milli-Q@纯水,注射用水(WFI),或类似的生物级水)、1N氢氧化钠、25mL无菌塑料吸管、一次性0.1μm, 0.2um, 0.22μm PES真空无菌过滤器、无菌高聚乙烯或聚丙烯试剂瓶。

​配制过程:
1g的PEI 25K#FSF0001900mL水溶解搅拌、加热(60-80°C)加HCl调pH到2.0左右盖上烧杯,搅拌3h(直至粉末完全溶解)冷却至室温加NaOH调pH到6.9-7.1移液到量筒,加水补足至1L真空过滤消毒分装,-20°C保存。
1g的PEI MAX 40K#FSF0002900mL 水溶解搅拌、加热(60-80°C)加1N NaOH调pH到6.9-7.1移液到量筒,加水补足至1L真 空过滤消毒分装, 4° C保存。
注意:加热或加酸都有助于PEI溶解(特别是配制PEI 25K,只加热溶解不了,需要适当加酸的),详细用量可试加一点搅拌看看,足够溶解就行,不一定需要加到pH那么低。

转染液贮存和保存期:
分装存放在无菌高聚乙烯或聚丙烯试剂瓶中PEI 25K溶液可在-20°C保存长达一年,部分解冻的溶液可在4°C保存2周,不可反复冻融。
PEI MAX 40K转染溶液在4° C可保持其性能至少6个月效果最佳,稳定存放此溶液可能适用一年。不可反复冻融。
 
上一篇:细胞焦亡检测抗体?你想要的Affinity都给你!
下一篇:没有了

产品全面

生命科学领域综合服务商

优质采购方案

为您呈现不一样的服务

正品保障

正品保障 提供发票

急速物流

现货闪电 当时发货

售后无忧

不满意退货
© 2005-2019 上海复申生物科技有限公司 版权所有,并保留所有权利
沪ICP备12006830号-4
技术支持:库价化学