多聚D-赖氨酸（分子量：15-30万）

产品描述

多聚赖氨酸（poly-lysine）是一种带正电荷的氨基酸聚合物，能够结合于DNA，红细胞膜或任何带负电荷蛋白，是一种非特异性的细胞粘附因子，促进细胞吸附到固相基质上。作用机理在于其可增强细胞膜表面的负电荷离子和固相基质表面（如细胞培养皿，载玻片等）的静电相互作用。当吸附到培养表面后，多聚赖氨酸提高用于细胞结合的阳离子结合位点数。多聚赖氨酸分子量的大小与粘度相关，即分子量较低，粘度较低，使用越容易；分子量较高，粘度较高，提供的粘附位点也较多。分子量＞30,000的聚赖氨酸适用于促进细胞粘附到固体基质。

多聚赖氨酸（poly-lysine）有两种常见亚型，D-和L-型。由于多聚赖氨酸是细胞结合的非特异性粘附因子，两种亚型都可用作包被固体基质，在细胞培养中都可促进细胞的贴壁生长。据报道多聚L-赖氨酸能够改善蛋白在ELISA培养板上的粘附性。然而细胞应用中，某些细胞能够水解多聚L-赖氨酸。此种情况必须使用多聚D-赖氨酸作为粘附因子，从而保护细胞不会因摄取过量L-赖氨酸而被破坏。

本品为多聚-D-赖氨酸（Poly-D-lysine），分子量为150,000-300,000，适用于细胞培养。用作细胞培养基质，推荐使用量为：对于25cm2的培养板需要0.1mg/ml的聚赖氨酸溶液约0.5ml-1.0ml。本品也能用作组织学分析时的粘片剂。

使用方法 

1. 储存液准备 

将10mg粉末溶于2ml无菌去离子水中充分溶解后，用0.2μm低蛋白吸附的滤膜过滤除菌后，即得到 5mg/ml 的 poly-D-lysine 储存液，可直接用于细胞培养用途。为了保持多次使用造成的污染，可将储存液以单次使用量分装到无菌管子内，4℃或者-20℃保存，至少1年有效。 

2. 细胞培养用包被基质 

使用多聚D-赖氨酸进行细胞相关包被实验，需根据不同的细胞系和应用进行包被条件的优化。一般步骤如下：

1）使用无菌组织培养级水或者PBS 将5mg/ml poly-D-lysine 储存液稀释到最适合自身实验体系的包被浓度。通常情况下，常用的培养皿/板包被浓度为 0.1mg/ml，即将储存液稀释 50 倍后使用。 

2）无菌条件下包被细胞培养板，使用量 0.5ml-1.0ml/25cm2。轻轻摇动板底以使其覆盖整个板面。

3）5min 后，用枪移除培养板表面溶液，并用无菌组织培养级水或者 PBS 清洗板面；【注意】：有的情况需要 1~2 个小时来完成铺板，有的时候需要过夜铺板。依情况而定。 

4）至少干燥 2h 后，方可进行细胞培养。 

【注意】：如果多聚赖氨酸包被后的玻璃器皿或玻片必须除菌，可用γ-射线照射（而非高压灭菌）对其进行除菌。 

【注意】：如果包被表面不平整，可用1mM 醋酸镁预处理玻璃载玻片2-3h，彻底清洗干净后再开始包被。 或者玻璃载玻片用酸清洗（盐酸或硫酸），经此处理能让多聚赖氨酸溶液包被很平整。 

3. 组织学研究（玻片的包被） 

一般推荐 0.1%（w/v）的 poly-D-lysine 溶液用于组织学玻片的制备。将玻片用相应浓度的多聚赖氨酸溶液处理 5min 后，清洗玻片并将其室温过夜干燥或者在约 60℃的烤箱内烘干~1h。【注意】：此工作溶液装在塑料瓶中于 4℃保存，并限制使用次数在 4 次以内。

运输和保存方法

冰袋运输。保存 ：−20°C 干燥保存，3 年稳定

注意事项

1）在某些细胞培养应用中，一些细胞会消化多聚 L-赖氨酸并吸收，摄入过多的多聚 L-赖氨酸会产生一定的细胞毒性。因此，遇到这种情况建议选用多聚 D-赖氨酸（Poly-D-lysine）。 

2）本品以氢溴酸（HBr）的形式提供，若想去除本品中的氢溴酸，可将本品溶于中性缓冲液，透析除去盐 离子。

3)为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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