吉姆萨/姬姆萨染色液试剂盒（Giemsa stain,10×原液）

产品简介
  姬姆萨色素(又称吉姆萨色素)是由天青Ⅱ与伊红混合而成。Giemsa染色原理和结果与瑞氏染色基本相同，姬姆萨染色液对胞浆着色力较强，能较好的显示胞浆的嗜碱性程度，特别是对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒，着色清晰，但是对胞核着色偏深,核结构显色不佳，故姬姆萨染液常与瑞氏染液联合使用。
  FUSHENBIO公司 Giemsa Stain以进口的姬姆萨色素、甲醇为主要原料，含特有衬染剂，经研磨配制而成，能呈现出清晰的细胞染色效果。经常用于组织切片、血液和细胞涂片、细菌、染色体显带、原生动物寄生虫等染色。该染色液中姬姆萨色素浓度远高于普通吉姆萨染色液，经常用于血液、细胞涂片等染色，亦可以用于组织切片染色。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性，与碱性染料美蓝或天青结合，染紫蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染淡紫色，称为中性物质。
  本品Giemsa Stain solution(10*Stock solution )为10×原液，按姬姆萨浓缩液：姬姆萨稀释液：蒸馏水=1:1:8，充分混匀即为姬姆萨工作液，可直接使用，不易保存，现用现配。

产品组成

储存条件：室温，避光保存，36个月有效。

自备材料：
1、载玻片
2、蒸馏水
3、甲醇
4、显微镜
5、0.1～0.5%乙酸

操作步骤(仅供参考)
(一) 一步法涂片染色
1).Giemsa工作液的配制:按试剂(A):试剂(B):蒸馏水=1:1:8 混合，即取1份GiemsaStain(10x)、1份磷酸盐缓冲液(10x)、8份蒸馏水，充分混匀，即为 Giemsa 工作液;Giemsa 工作液为即用型试剂，不易保存，即用即配。  

2).按常规方法制备血涂片，待血膜干后，用甲醇固定2～3分钟。制备的血涂片需厚薄适宜，分布均匀，以免影响染色结果。        

3).将血涂片或骨髓涂片放置染色架上，滴加稀释好的染色液使覆盖全部血膜，室温染色15～30分钟。

4).用自来水缓慢从玻片一端冲洗(注意勿先倒去染液或直接对血膜冲洗)，凉干后镜检。

(二) 两步法涂片染色

1).Giemsa工作液的配制:按试剂(A):蒸馏水=1:4 配制Giemsa工作液,即取1份GiemsaStain(10x)加入到4份蒸馏水中充分混匀，即为Giemsa工作液;Giemsa 工作液为即用型试剂，不易保存，即用即配。

2).磷酸盐工作液的配制: 按试剂(B):蒸馏水=1:4 配制磷酸盐工作液，即取1份磷酸盐缓冲液(10x)加入到4 份蒸馏水中充分混匀，即为磷酸盐工作液。

3).常规方法制备血液涂片或骨髓涂片，待涂片自然干燥后，用甲醇固定1~3min。

4).将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上，滴加 Giemsa,工作液覆盖涂片，室温滴染 10~15min.

5).加入等量磷酸盐工作液，轻轻晃动载玻片，室温静置 5~10min。

6).用自来水或蒸馏水缓慢从玻片一端冲洗。干燥、镜检。

染色结果：

(三) 组织切片染色

1).Giemsa工作液的配制:按试剂(A):试剂(B):蒸馏水=1:1:8 配制，即取1份Giemsa1、Stain(10x)、1份磷酸盐缓冲液(10x)、8份蒸馏水，充分混匀，即为Giemsa工作液;Giemsa工作液为即用型试剂，不易保存，即用即配。

2).新鲜组织立即置于Regaud固定液固定2 天，期间应更换1次固定液。(Regaud 固定液:按 3%重铬酸钾:甲醛=4:1 配制，临用前混匀，1 ~2 天后失效。)

3).3%重铬酸钾固定1天。

4).流水冲洗 16 个小时或过夜。

常规脱水、包埋，切片厚度约为5um。

5).常规二甲苯或脱蜡透明液脱蜡至水，蒸馏水清洗2次，每次1min。

6).入含 Giemsa工作液染缸，浸染18~24h，蒸馏水稍微清洗。

7).0.1~0.5%乙酸洗1~2min，自来水稍微冲洗。

8).用无水乙醇迅速脱水3次，每次 5~10s。

9).二甲苯或浸蜡脱蜡透明液透明，中性树脂封固。

染色结果： 

注意事项

1）血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀，以免影响染色效果。
2）涂片染色中Giemsa染色后，请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。
3）如果染色过深或过浅，应调整染色时间或工作液浓度。
4）涂片染色和组织切片染色中，pH值对染色有一定影响，载玻片应清洁、无酸碱污染，以免影响染色效果。
5）染色液经稀释后液面应金属光泽则表示染液有染色作用，否则染色液可能失效。
6）组织切片染色中，染色后需用大量0.1～0.5%乙酸急速冲洗，避免浮面沉淀物污染切片后难以洗脱。

7）0.5%乙酸分化常用于Diemsa组织切片染色，如有必要亦可用于细胞涂片，但其浓度应适量下调。0.5%乙酸分化切片时，切片呈粉红色即可终止。
8）Giemsa组织切片染色中，无水乙醇脱水要迅速，否则切片易褪色。
9）染色液可重复使用，但不能多次重复，若有沉淀物应过滤后使用。
10）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
 

相关产品