FM 1-43膜染色剂

产品简介

FM 1-43 ,英文全名: N-(3-Triethylammoniumpropy)-4-(4-(Dibutylamino) Styry) Pyridinium Dibromide ,是一种亲脂的苯乙烯染料,是一种优秀的膜探针用来鉴定活跃的放电神经元和用于调研活动依赖性的襄泡循环。这- -水溶性的染料对细胞无毒 , 且在水溶液中基本无荧光，- -旦插入细胞膜外层后发射强荧光。在活跃释放神经递质的神经元中, FM 1-43内在化进入循环的突出衰泡,神经末梢被明亮染色。成像检测前只需简单清洗去除非特异性得细胞表面膜染色。

还可提供FM 1-43FX（CAT:FS1375）是可固定的FM 1-43类似物，FM1-43 只能用于活细胞染色；FM 1-43 FX活细胞染色后，兼容醛类固定。（比如：多聚甲醛或戊二醛）。

产品特性

1）CAS:149838-22-2

2) 分子式：C30H49Br2N3

2） 分子量：611.5452

3） 纯度：≥95%（HPLC）

4） 外观：橙色固体 

5） 溶解性：溶于水、DMSO

6） Ex/Em：510/626nm (MeOH); 480/598 (membrane-bound);

7） 化学结构式：

保存与运输方法：-20°C避光干燥保存，至少1年有效。 冰袋运输。

使用方法

1）FM 1-43储存液(1000X):用水溶解FM1-43配制4mM储存液。按20μL每管分装保存在-20°C避光。如果希望标记后固定样本,选择FM 1-43FX.

2）HL-3 + 90 mM KCI|溶液: 25 mM NaCI, 90 mM KCI, 10 mM NaHCO3, 5 mM HEPES, 30 mM sucrose, 5 mM threalose, 10 mM MgCl2, pH to 7.2.新鲜制备,超过2d后不可使用, 4°C保存。加入CaCl2 ( 1M标准液)以得到终浓度为1.5mM的CaCl2 (或希望使用的其他浓度) 。

染色方法（仅作参考）

【注意】：

1）以下以爬片生长的贴壁活细胞的质膜染色为例，仅作参考。最佳的染色条件根据使用细胞特征进行调整。

2）由于FM 1-43快速被内吞，很有必要参考下方的温度和时间指导来减慢内吞，提高质膜的选择性标记和成像。内吞很可能在染色的10min内发生。

3）以下步骤推荐使用不含钙镁的HBSS（FSH041-500ML）。钙镁的存在明显会加速染料内吞，导致质膜选择性染色很弱。

4）用提前冰浴的HBSS缓冲液来稀释储存液到所需的工作浓度比如8μM。

5）将盖玻片从培养基内取出，快速的浸入含足量FM 1-43的染色工作液，冰上孵育1min。质膜能被快速染色。

6）将盖玻片从染色工作液中取出，置于载玻片上封片，周围用石蜡密封，置于冰上，立即成像。

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