Zymolyase-20T from Arthrobacter luteus 酵母溶壁酶，来自藤黄节杆菌
| 英文名 | Zymolyase-20T from Arthrobacter luteus 酵母溶壁酶，来自藤黄节杆菌 | ||
| 产品编号 | FSF0005 | ||
| 产品分类 | 核酸电泳系列 | ||
| 纯度 | ≥20,000 units/g | 储存条件 | 2-8℃ |
产品简介
Zymolyase-20T是藤黄节杆菌（Arthrobacter luteus）深层发酵产生并通过硫酸铵沉淀纯化获得的一种新型酶制品，由短小芽孢杆菌的培养液制备成，具有强烈的酵母菌活细胞壁溶解活性，产生各种酵母细胞株的原生质体或原生质球。本酶制品决定酵母细胞壁溶解活性的必需酶是β-1,3-葡聚糖昆布五糖水解酶（β-1,3-glucan laminaripentaohydrolase），该酶水解β-1,3-连接的线性化葡萄糖聚合物，释放出特异性的昆布五糖（也是最主要和最小的水解产物单元）。Zymolyase-20T的溶解范围根据酵母类型、酵母生长周期或培养条件有所变化。
本品以冻干粉形式提供，酶比活力为20,000 units/g，易溶于水，适用于原生质体/原生质球制备、酵母细胞融合、酵母细胞转化和酵母遗传学研究。 基本特性
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来源 |
藤黄节杆菌（Arthrobacter luteus） |
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外观 |
冻干粉 |
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纯化方式 |
硫酸铵沉淀 |
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比活力 |
≥20,000 units/g |
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必需酶 |
β-1,3-葡聚糖昆布五糖水解酶 |
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含有的其他活性酶* |
β-1,3-葡聚糖酶 |
约1.5 x 106 units/g |
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蛋白酶 |
约1.0 x 104 units/g |
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甘露聚糖酶 |
约1.0 x 106 units/g |
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污染酶 |
淀粉酶，木聚糖酶，磷酸酶 |
微量 |
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最佳 pH和温度 |
pH7.5, 35°C（裂解活酵母细胞）；pH6.5, 45°C （水解酵母葡聚糖） |
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稳定pH范围 |
pH 5-10 |
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热稳定性 |
60°C，5min酶活性完全损失 |
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激活剂 |
巯基化合物比如半胱氨酸，β-巯基乙醇或DTT |
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特异性（溶解范围） |
Ashbya, Candida, Debaryomyces, Eremothecium, Endomyces, Hansenula, Hanseniaspora, Kloeckera, kluyveromyces, Lipomyces, Metschnikowia, Pichia, Pullularia, Torulopsis, Saccharomyces, Saccharomycopsis, Saccharomycodes, Schwanniomyces, etc. |
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[*]：参考文献Kitamura, K., Kaneko, T., Yamamoto, Y., Appl. Microbiol., 18, 57 (1972)进行各种酶活力定义。 |
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活力测定
1. 单位定义：在以下反应条件的反应体系中吸光值A800下降30%定义为一个酶活力单位（unit）。
2. 反应体系: 底物--------3ml啤酒酵母细胞悬液（2mg 干重/ml）
缓冲溶液--------5ml 1/15M 磷酸盐缓冲液，pH7.5
酶溶液--------1ml Zymolyase-20T Solution;0.05-0.1mg/ml
去离子水--------1ml
总体积-------- 10ml
3. 反应程序:25℃孵育2h后轻轻混匀体系，于800nm处测定吸光值。以1ml去离子水替代酶溶液的混合液作为对照。
4. 计算酶活力：A800降低百分比（对照组A800-反应组A800）x100/对照组起始A800
当A800吸光度减少60%，相当于2units.此时反应体系中啤酒酵母细胞完全裂解，意味着1unit本品能裂解3mg干重啤酒酵母。
注意事项
1) 收到本品需2-8℃干燥保存，至少1年有效，如Zymolyase®-20T冻干粉置于30℃，3个月酶活力损失约70%。溶于缓冲液配制成存储液后，短期至于2-8℃保存，约2周稳定，长期请置于-20℃保存，约数月稳定。
2) 当需要制备无菌酶溶液，(本品易容于水，建议1/15M 磷酸盐缓冲液，pH7.5溶解，或用自己实验体系相关缓冲液来溶解，也可根据文献来制备储存液)可用除硝酸纤维素膜之外的0.22um滤膜过滤除菌。
3) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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