FITC标记鬼笔环肽

英文名 FITC Phalloidin
产品编号 FS0382
产品分类 荧光探针及染色
纯度 储存条件 -20℃
大包装询盘

本品为FITC标记的鬼笔环肽,染色反应特异性强,对比性高,具有比Actin抗体更好的染色效果,适合用作F-actin的定性和定量检测。另外,经本品结合后的F-actin仍能维持actin自身具有的许多生物学特性。且本品的结合没有物种差异性,适用性广泛。

运输与保存方法

冰袋运输。-20℃避光干燥保存, 1年有效。

 

产品性质

分子式

C56H60N10O15S2

分子量

1177.3

最大激发/发射波长(Ex/Em

495~496/513~516nm

多肽序列

FITC-bicyclic(Ala-DThr-Cys-cis-4-hydroxy-Pro-Ala-2-mercapto-Trp-4-hydroxy-5-amino-Leu)(S-3 to 6)

外观

黄色粉末(冻干粉)

溶解性

溶于DMSO、DMF、甲醇或者乙腈水溶液(20%)

操作步骤

工作液准备:对于FITC标记鬼笔环肽。本品以溶于甲醇的20µM储存液形式提供,建议收到产品后,根据单次使用量,对母液进行小量分装,-20℃避光冻存,一年稳定。

开始实验前,使用1×PBS缓冲液稀释储存液到需要的工作浓度。推荐工作浓度为:80~200nM。工作液现配现用。按照100nM浓度来计算,可进行300次细胞染色。

染色步骤

1:细胞爬片生长24h,使其密度达到50%汇合度。

2:吸掉培养液,37℃预热的1×PBS(pH 7.4)清洗细胞2次。

3:使用溶于PBS的4%甲醛溶液进行细胞固定,室温固定10min。  注意:避免固定剂中含有甲醇成分,因为甲醇在固定过程中可能破坏肌动蛋白。

4:室温条件下,用PBS清洗细胞2~3次,每次10min。

5:室温条件下,用丙酮(≤-20℃)脱水或者用0.5% Triton X-100溶液透化处理5min。

6:室温条件下,用PBS清洗细胞2~3次,每次10min。

7:取200µl配制好的FITC标记鬼笔环肽工作液,覆盖住盖玻片上的细胞,室温避光孵育30min(通常情况下,4℃~37℃孵育皆可)。 注意:为了降低背景,可于FITC标记的鬼笔环肽工作液内加入1% BSA;另外,孵育过程中为了避免溶液挥发,可将盖玻片转移到一个密封的容器内。

8:用PBS清洗盖玻片3次,每次5min。

9:使用200µl DAPI溶液(浓度:100 nM)对细胞核进行复染,约30s。

10:用PBS清洗盖玻片,然后倒置在已经滴有一滴Fluoromount-GTM 水溶性封片剂的载玻片上。使用纸巾轻轻檫掉多余封片剂,然后用指甲油永久封片。此法制备的标本玻片可置于4℃避光保存,通常6个月内可继续做F-actin染色分析。

11:荧光显微镜或者共聚焦显微镜下进行荧光观察,选择FITC激发/发射滤片(Ex/Em=496/516nm)和DAPI激发/发射滤片(Ex/Em=364/454nm)

注意事项

1) 鬼笔环肽具有毒性,需小心操作(对人的半数致死剂量LD50约2mg/kg)。

 

2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

产品全面

生命科学领域综合服务商

优质采购方案

为您呈现不一样的服务

正品保障

正品保障 提供发票

急速物流

现货闪电 当时发货

售后无忧

不满意退货
© 2005-2019 上海复申生物科技有限公司 版权所有,并保留所有权利
沪ICP备12006830号-4
技术支持:库价化学